腸道中含有數(shù)量巨大的微生物,，這些微生物在維持人類生命健康方面發(fā)揮著重要作用,。近來研究發(fā)現(xiàn)腸道微生物與炎性腸?。?/span>IBD）,、結(jié)直腸癌（CRC）,、肥胖,、二型糖尿病等多種疾病密切相關(guān),。因此，加強對腸道微生態(tài)的了解有助于對一些腸道疾病的診斷及治療,。

腸道微生物群的檢測方法眾多,，通過研究小鼠糞便中微生物的群落結(jié)構(gòu)來反映腸道微生態(tài)是許多研究人員選用的方法。采集糞便簡單,，易操作,，但具體如何操作，如何避免糞便樣本被雜菌污染,，仍有諸多細節(jié)需要注意。

采集流程

1準備采便所需器材
采便器,，鑷子或者牙簽,，紙巾，采集管,，酒精噴壺,，冰盒，超凈臺

注：如果沒有采便器,，可以使用滅菌后的空鼠籠代替

2高溫高壓或紫外滅菌器材
將采便器或者空鼠籠,，鑷子或者牙簽，紙巾,，采集管通過高溫高壓滅菌后傳入動物房,。無法通過高溫高壓滅菌的，紫外線照射30分鐘后通過傳遞窗傳入,。然后將器材放置超凈臺,。

3 促使小鼠應激排便，或者將小鼠放入采便器,，等待自然排便

應激排便：采集樣本較少（1-2顆）及小鼠排便正常時,，可以直接應激排便，固定小鼠,，將其尾部提起,，用手指輕輕按壓小鼠下腹部，小鼠排便后及時采集到無菌的EP管中,。

自然排便：采集樣本較多時,，將小鼠放入采便器或者空鼠籠,，等待小鼠自然排便。小鼠排便過程中,，及時采集小鼠糞便,，避免小鼠將糞便踩踏污染。小鼠排便到足夠的數(shù)量后及時將小鼠放回飼養(yǎng)籠中,。

注：如果使用空鼠籠,，需要鋪墊紙巾，避免小鼠尿液污染,，采便器中層有紗網(wǎng),，尿液可以直接漏下去。小鼠活動面積越大,，越能避免踩踏糞便,。

4 取出糞便及保存

使用鑷子或者牙簽采取糞便，采取下一只小鼠糞便的時候,，需要酒精擦拭鑷子或者換一根新的牙簽,，避免不同小鼠之間糞便污染。將采取的糞便及時放入采集管,，置于冰盒中,，最后及時轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。如果糞便形狀不同,，或者有便血的情況,，需要做好記錄。

注意事項

1糞便樣本采集在一天的同一時段進行（最好是早晨）避免微生物組成在同一天不同時間內(nèi)發(fā)生變化,。采集糞便場所光線充足,，保持通風。

2 采便過程中,，需要時刻關(guān)注小鼠排便情況,，及時采取，避免踩踏污染,。

3無菌采便需要的器械必須高溫高壓和或者紫外滅菌,，在超凈臺使用。

4 如小鼠不排便,，可順時針按摩腹部或者使用濕棉簽擦拭肛門,，促進排便。

5 采便時觀察小鼠糞便形狀以及是否便血,，做好糞便記錄,。

6 取出的糞便及時放到冰上，最終轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。

7 在實驗飼養(yǎng)期間,，要盡量保持整個過程中飼料和墊料的一致性,，最好采用同一批次