《中國心血管病報告2016》指出1990-2015年,,心血管病死亡是城鄉(xiāng)居民總死亡原因的首位,,2015年,中國城市和農(nóng)村心血管病死亡率分別為265/10萬和298/10萬,,在全部死亡原因中的比例超過40%,,其死亡率已超出腫瘤、呼吸疾病,、損傷/中毒和消化疾病所導致的死亡率,。而急性心肌梗死是其中一個致死因素,2015年急性心肌梗死的死亡率在城市和農(nóng)村分別達到56.38/10萬和70.09/10萬,。
圖1 2002~2015年中國城鄉(xiāng)地區(qū)急性心肌梗死死亡率變化趨勢
心肌梗死是指心肌的缺血性壞死,,是一種急性及嚴重的心臟狀態(tài)。心臟作為血液循環(huán)動力中心這一功能的實現(xiàn),,需要冠狀動脈不斷提供的血流供應,,當冠狀動脈發(fā)生病變而狹窄或堵塞,使得冠狀動脈的血流急劇減少或中斷,,便會使相應的心肌出現(xiàn)嚴重而持久地急性缺血,,心肌無法得到足夠氧氣,最終導致心肌不可逆的缺血性壞死,,心臟的收縮和舒張功能降低,,機體供血不足,嚴重者最終導致機體死亡,。
鑒于心肌梗死是危害人類健康的心血管疾病之一,,而心肌梗死動物模型的開發(fā)與應用是研究心肌梗死的機制及治療的關(guān)鍵,是研究人類心肌梗死的病理生理變化,、心電生理變化及客觀評估治療方法的重要工具,,故開發(fā)心肌梗死模型具有重要的意義。
通過冠狀動脈左前降支結(jié)扎引起模型動物的冠狀動脈狹窄或閉塞,,使該冠脈所供應的心肌缺血,、壞死,,從而引起模型動物心肌梗死。
造模方法簡單的來說,,分為3步:第一,,麻醉模型動物,在第四肋間行左胸開胸術(shù)(敲黑板:異氟烷氣麻,!戊巴比妥鈉腹腔麻醉會影響心功能),;第二,小心地將心包膜打開,,在左心耳尖遠端結(jié)扎左冠狀動脈前降支(LAD)(劃重點:如果結(jié)扎成功,,心電圖可觀察到ST波段上抬,沒有心電圖,?沒關(guān)系,!肉眼可觀察到左前心室壁變白);第三,,關(guān)閉胸腔(可于破口處或腹腔注射青霉素,,防止模型動物因感染死亡)。
圖2 C57小鼠心肌梗死取材圖
可見心肌梗死造模后,,梗死區(qū)域呈藍色透明,。
1. B超評價心功能:造模后的EF值比假手術(shù)組低(氣麻!)。
圖3 B超檢測心功能過程圖
2.伊文思藍-TTC染色觀察梗死面積:伊文思藍染色后梗死區(qū)域呈紅色,,正常區(qū)域呈藍色,,TTC染色后梗死區(qū)為白色,梗死邊緣區(qū)為磚紅色,,正常區(qū)為紅色,。
圖4 伊文思藍染色觀察心肌梗死
圖5 TTC染色觀察心肌梗死
3.病理檢測:HE染色觀察病理,masson染色觀察心臟的纖維化等,。
圖6 HE染色
HE 染色結(jié)果可見,,對照組(左圖)心肌排列整齊、細胞質(zhì)豐富均勻,、間質(zhì)正常 ,;模型組(右圖)部分心肌細胞核丟失、心肌細胞呈空泡樣變,、梗死區(qū)可見心肌組織紊亂,、梗死區(qū)心肌細胞消失,代之以纖維瘢痕組織,。
圖7 Masson染色
Masson染色,,對照組(左圖)肌纖維染成紅色,而模型組(右圖)由于心肌細胞消失,,代之以纖維膠原沉積,,膠原纖維染成藍色,。