細胞質(zhì)量決定實驗的進程與結(jié)果,,相信很多小伙伴在細胞培養(yǎng)上走了不少彎路,因為細胞一旦污染,,大多數(shù)較難處理(只有扔),。由于細胞污染而耽誤了實驗進度,,影響畢業(yè)和發(fā)文章進程的事件時常發(fā)生。
所以今天靈賦拓普整理了一下細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法,,了解到底哪里出了問題,?下次應(yīng)該怎么避免。學(xué)會對各種污染情況的辨別和處理是一項不可或缺的實驗技能,,希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實驗操作,,學(xué)會如何應(yīng)對細胞污染。
1.1,、細菌污染
細菌污染最為常見,,一旦操作稍有不當(dāng),就會引起細胞污染,,細菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)球形,、桿狀等,其次,,培養(yǎng)液發(fā)黃,,變渾濁,還有異樣氣味發(fā)出,,如下圖所示:
處理方法:在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,,但是對細胞本身也有影響,狀態(tài)會變差,,所以,,防范于未然,嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,,需要定期清理消毒培養(yǎng)設(shè)施,。
1.2、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,,不會像細菌感染大爆發(fā),,所以很難早期發(fā)現(xiàn),鏡下有時候呈現(xiàn)絲狀,、珊瑚狀,。
處理方法:趕緊扔掉,不要再想挽救,。然后消毒滅菌細胞房,,細胞培養(yǎng)箱,,器皿等。
1.3,、霉菌污染
培養(yǎng)液是清亮的,,慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,,如同風(fēng)中柳絮,,一般不仔細看發(fā)覺不出來。細胞仍可生長,,但時間一長,,細胞的狀態(tài)就變差,不再增長,。
處理方法:建議果斷舍棄該污染細胞,,將環(huán)境徹底消毒,采用75%酒精擦洗一遍細胞培養(yǎng)箱,,再用新潔爾滅擦洗一遍,,把水盤里加上飽和量的硫酸銅。
1.4,、支原體感染
支原體感染細胞以后,,細胞病變不很明顯,只是細胞狀態(tài)變差,、生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點,細胞空泡化,,很多類似凋亡,、壞死的細胞,最終細胞漂浮,,完全死亡,。
處理方法:使用支原體清除培養(yǎng)基。
1.5,、黑膠蟲污染
顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體,,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,,細胞還是可以用的,。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,,且培養(yǎng)液顏色,、透明度無明顯變化,,對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,。
處理方法:使用黑膠蟲去除劑,,盡早處理細胞,越快越好,。
2.1 污染原因一:培養(yǎng)箱太久沒清潔
細胞污染了,,不應(yīng)該直接扔了培養(yǎng)皿就完事了;你還得看看這個細胞培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿是否污染,,需要培養(yǎng)箱做個大掃除,,重新酒精消毒,照紫外,;半個月?lián)Q一次細胞培養(yǎng)箱里的水,,每次用酒精擦洗托盤。
(深圳靈賦拓普生物科技有限公司---細胞房設(shè)備)
2.2 污染原因二:超凈臺和桌面,,清理不到位
(深圳靈賦拓普生物---細胞房設(shè)備)
超凈臺里不能堆放大量的培養(yǎng)皿,、各種規(guī)格的板子、槍頭等,,防止紫外線照不到衛(wèi)生死角,,還會影響超凈工作臺里的氣流穩(wěn)定。細胞房里的桌面,,切忌東西堆積如山,。
2.3 污染原因三:細胞房人多,著裝不規(guī)范
(深圳靈賦拓普生物---細胞房著裝要求)
細胞房衛(wèi)生要求很高,,人多了,,不確定因素多了。另外,,要按要求合理著裝,。超凈臺做實驗時,做試驗時喜歡說話,,殊不知你說話時的氣體里面就有很多細菌呢,,盡量不閑聊。
3:結(jié)語
細胞污染不易察覺,,卻是關(guān)乎我們實驗成敗的大事,,越是需要我們?nèi)粘5恼J真對待,相信以上對于細胞房常見污染物的鑒別和解決方案的制定,,能幫助我們科研工作者解決細胞最重要的問題,,如果您還是未找到問題所在,歡迎您留言,,我們期待著為您解答,。