小鼠行為學(xué)實驗是研究人類發(fā)病機(jī)制、評價疾病模型造模效果和新藥效果的一種重要實驗手段，在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué),、藥學(xué)等領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。小鼠行為學(xué)實驗可以科學(xué)客觀地評價其溝通,、社交,、學(xué)習(xí)和探索能力等。

行為學(xué)實驗均采用同窩對照原則,，將實驗組和對照組小鼠每組取 10 只左右進(jìn)行實驗,，小鼠的飼養(yǎng)條件為：4-5只同性別小鼠飼養(yǎng)于底部墊鋸末碎屑的透明塑料箱，自由飲水和喂食,，飼養(yǎng)室恒溫（25±0.5℃）,、恒濕（50-60%）、環(huán)境安靜,、通風(fēng),。

在行為學(xué)實驗前由實驗人員對小鼠進(jìn)行為期一周的撫摸，每天5min,，并且在測試前30-60 min將小鼠帶入測試室,，讓其適應(yīng)實驗環(huán)境，避免搬運過程和新環(huán)境給小鼠帶來焦慮情緒,，實驗室應(yīng)當(dāng)保持安靜,，禁止在同一實驗室內(nèi)處死動物或?qū)游镞M(jìn)行采血。

(一)曠場實驗

?小鼠在新異環(huán)境中對新奇事物充滿好奇,，會出現(xiàn)探索行為,，但也有畏懼空曠場地的天性，從而出現(xiàn)趨避行為,。曠場實驗(Open Field Test,，OFT)就是利用小鼠的天性，對其緊張度和探索性行為進(jìn)行判斷,，系統(tǒng)評估小鼠的探索能力,、基本運動能力以及焦慮行為。

每個曠場試驗箱的尺寸為40cm*40cm*35cm，需將小鼠提前30-60min放置在實驗區(qū)域附近,。實驗時把小鼠輕放在箱子中央,，讓小鼠在實驗箱內(nèi)自由探索30min，用視頻軟件錄制小鼠30min內(nèi)的運動軌跡,，并用視頻分析軟件進(jìn)一步分析小鼠在30min內(nèi)運動的總距離,、在中心位置停留的時間及前5min內(nèi)運動的總距離和在中心位置停留的時間。在實驗前后均用75%酒精充分擦拭實驗裝置,，避免氣味對實驗結(jié)果造成影響,。如果小鼠更傾向于在曠場試驗箱中間運動，解讀為抗焦慮行為,，反之則為焦慮行為,。

(二)埋珠實驗

?埋珠實驗(Marble Burying Test)是檢測小鼠是否出現(xiàn)刻板行為的主要手段，首先準(zhǔn)備干燥清潔的40cm*30*22cm的飼養(yǎng)盒,，底部鋪5cm厚的墊料,，把準(zhǔn)備好的20顆標(biāo)準(zhǔn)玻璃珠（直徑14mm-15mm）按4列5行均等擺放在墊料上，把小鼠輕放至盒子的同一個角,，測試30min,，如果玻璃珠超過三分之二的部分被墊料覆蓋，則認(rèn)為該玻璃珠被小鼠掩埋,。記錄測試小鼠掩埋的玻璃珠數(shù)量,，數(shù)量越多，說明小鼠越刻板,。

 (三)Y迷宮實驗

?Y迷宮實驗（Y-maze Test）模型用來研究小鼠的空間識別記憶能力,，這種迷宮利用了小鼠對新異環(huán)境天然探究的自然習(xí)性，不需要動物學(xué)習(xí)任何規(guī)則來趨利避害,，能夠有效地反映出動物對新異環(huán)境的識別記憶能力,，本實驗采用磨砂非透明有機(jī)塑料，按“Y”的形狀制作,，分為A,，B，C三個臂（長35cm,，寬10cm,，高20cm），三個臂之間的夾角均為120°,。實驗開始時,，把小鼠按同一方向放置在三個臂的交界處，任其在裝置內(nèi)穿梭,，記錄5min內(nèi)小鼠進(jìn)入各臂的順序,，小鼠進(jìn)入各臂三分之二及以上處記為成功進(jìn)入該臂,，否則不算進(jìn)入。為了消除動物之間的氣味,，保證實驗儀器的環(huán)境衛(wèi)生,，在實驗前后均使用75% 酒精進(jìn)行擦拭，待酒精揮發(fā)干凈再進(jìn)行下一輪實驗,，味道和殘留的酒精均會影響實驗動物的行為結(jié)果,。實驗結(jié)束后分析進(jìn)入各臂的順序,，按“ABC” “ACB” “BCA”“BAC”“CAB”“CBA”出現(xiàn)的形式記為正確轉(zhuǎn)換,。正確轉(zhuǎn)換率=（正確轉(zhuǎn)換次數(shù)/總轉(zhuǎn)換次數(shù)）*100%，正確轉(zhuǎn)換率越高,，說明小鼠空間識別記憶能力越強(qiáng),。

(四)高架十字迷宮實驗

?高架十字迷宮（Elevated-plus maze Test，EPM）通常由兩段開臂和兩段閉臂構(gòu)成,，距離地面51cm,，底部有一塊正方形底座，十字迷宮各臂長66cm,，寬5.0cm,，閉臂臂高15cm。小鼠由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動,，但出于好奇心和探究性又會在開臂中活動,，在面對新奇刺激時，動物同時產(chǎn)生探究的沖動與恐懼,，這就造成了探究與回避的沖突行為,，從而產(chǎn)生焦慮心理。高架十字迷宮實驗是一個簡單,、快速評價小鼠是否焦慮的一種方法,，因而廣泛應(yīng)用于抗焦慮藥物的研究與開發(fā)。

儀器上方裝有視頻錄像,，在實驗開始前將小鼠放入實驗房間適應(yīng)1h,，然后把小鼠輕放在十字迷宮的開臂與閉臂交接處的中心位置，測試開始前小鼠頭朝向開臂,，釋放小鼠的同時點擊視頻采集,，一共錄制5min視頻，觀察者距離迷宮中心至少１m,，記錄小鼠進(jìn)入開臂和閉臂的次數(shù)和在兩臂滯留時間（進(jìn)出臂標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)嚴(yán)格界定,，以四肢全部入臂或兩只前爪出臂為準(zhǔn)），用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,。計算小鼠進(jìn)入開臂次數(shù)和在開臂滯留時間分別占總次數(shù)（進(jìn)入開臂和閉臂次數(shù)總和）和總時間（在開臂與閉臂滯留時間總和）的百分比,，以此評價動物是否焦慮,，通常這兩個指標(biāo)呈高度相關(guān)，抗焦慮行為表現(xiàn)為小鼠進(jìn)入開壁次數(shù)的百分比和在開壁停留時間百分比均增加,，焦慮行為則相反,。

總結(jié) 

好了，本期小鼠行為學(xué)實驗知識（上）分享就到此啦,，小鼠行為學(xué)實驗知識（中）,、（下）篇我們會持續(xù)分享，感興趣的小伙伴保持關(guān)注哦~歡迎大家在評論區(qū)討論,，留言您想了解的話題或相關(guān)知識,。靈賦拓普生物擁有整套行為學(xué)儀器設(shè)備，詳情可咨詢致電：0755-86325431,，我們竭誠為您服務(wù),。