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小鼠行為學(xué)(下),,全是亮點(diǎn),,攻略請(qǐng)收藏好,!

發(fā)布時(shí)間:2024-04-19
動(dòng)物行為學(xué)

動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)種類繁多,分為學(xué)習(xí)記憶類,、抗焦慮抑郁類,、抗疲勞類、神經(jīng)精神類,、痛覺測(cè)試類等,,研究不同的疾病模型時(shí),研究人員需根據(jù)關(guān)注的具體行為選擇合適的研究手段,。前兩期(詳情請(qǐng)點(diǎn)擊小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(中):小鼠到底在想什么呀,?小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(上))我們分析了動(dòng)物行為學(xué)七個(gè)實(shí)驗(yàn),以此科學(xué)客觀地評(píng)價(jià)其溝通,、社交,、學(xué)習(xí)和探索能力等。本期小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(下)讓我們繼續(xù)盤點(diǎn)小鼠行為學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn),。

 

(八)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

?強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(Forced swimming test)原理主要是讓小鼠被迫在一個(gè)局限且無法逃脫的空間游泳,,由于嚙齒類動(dòng)物先天對(duì)水厭惡,,它們?cè)谒袝?huì)拼命掙扎游動(dòng),并試圖逃離水環(huán)境,,一段時(shí)間后,,發(fā)現(xiàn)逃離無望時(shí)動(dòng)物停止掙扎表現(xiàn)出“行為絕望”狀態(tài)(漂浮不動(dòng)狀態(tài))。小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)以游泳的不動(dòng)時(shí)間為主要指標(biāo)檢測(cè)動(dòng)物的絕望行為,,是抗抑郁藥物初篩以及檢測(cè)模型動(dòng)物是否出現(xiàn)抑郁行為的常用檢測(cè)實(shí)驗(yàn),。強(qiáng)迫游泳的測(cè)試缸為透明圓柱形(直徑15cm,高30cm),,測(cè)試之前,,向缸內(nèi)加入高15cm的水,水溫保持在23-25℃,,將實(shí)驗(yàn)小鼠放入測(cè)試缸內(nèi),,視頻記錄6min,記錄后面4min小鼠不動(dòng)的時(shí)間,。

(九)懸尾實(shí)驗(yàn)

?懸尾實(shí)驗(yàn)(Tail suspension test)是一種經(jīng)典而又能快速評(píng)價(jià)抗抑郁藥物,、興奮藥物、鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法,。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫,,從而放棄掙扎,進(jìn)入特有的抑郁不動(dòng)狀態(tài),,實(shí)驗(yàn)過程中記錄動(dòng)物不動(dòng)時(shí)間來反映抑郁狀態(tài),,抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài),。將小鼠懸吊在離工作臺(tái)20-25cm的地方,,用膠帶將小鼠的尾部分后1/3固定在支架上,小鼠只有在被動(dòng)地完全靜止的情況下才被認(rèn)為是不動(dòng)的,,在6min的時(shí)間內(nèi),,靜止時(shí)間由一個(gè)對(duì)研究背景不了解的實(shí)驗(yàn)人員記錄。

 

 

(十)水迷宮實(shí)驗(yàn)

?水迷宮實(shí)驗(yàn)(Morris water maze)是一種利用動(dòng)物厭水天性,,迫使動(dòng)物尋找水中隱藏可站立平臺(tái)的實(shí)驗(yàn),。并通過對(duì)小鼠尋找平臺(tái)所花費(fèi)的時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,判斷動(dòng)物對(duì)于空間位置和方向的記憶能力,。在圓形水池(直徑120cm )中放置一個(gè)逃生平臺(tái)(直徑10cm ),。水池注入水并用染料將水進(jìn)行染色,水溫保持在 23±1℃,,水迷宮東西南北方向自定義,,一般定義為S在實(shí)驗(yàn)者方向,N在實(shí)驗(yàn)者相反的方向,,E在右邊,,W在左邊,這樣迷宮就分為4個(gè)象限,,平臺(tái)位于其中一個(gè)象限的中間,。實(shí)驗(yàn)的平臺(tái)可放在一個(gè)象限中進(jìn)行所有的實(shí)驗(yàn),或者平臺(tái)在每一個(gè)象限中測(cè)試1/4的動(dòng)物,,后一種方法抵消了可能的象限效應(yīng),。一名實(shí)驗(yàn)人員可以使用8種不同的平臺(tái)位置。無論選擇哪個(gè)象限,,平臺(tái)通常位于中心和墻壁的中間位置,,盡管有時(shí)也會(huì)使用其他安排。為了防止形成起始位置與目標(biāo)平臺(tái)的產(chǎn)生長(zhǎng)短距離,,一般起始位置的選擇不應(yīng)選擇平臺(tái)所在的象限起始位置,,例如目標(biāo)是SE,起始位置可選N,、W,、NE、SW,。

獲得性訓(xùn)練:將小鼠頭朝池壁放入水中,,放入位置隨機(jī)取東(E)、西(W),、南(S),、北(N)四個(gè)起始位置之一。記錄動(dòng)物找到水下平臺(tái)的時(shí)間,。在前幾次訓(xùn)練中,,如果這個(gè)時(shí)間超過60s,則引導(dǎo)動(dòng)物到平臺(tái)或直接將動(dòng)物放在平臺(tái)上,,讓動(dòng)物在平臺(tái)上停留15s,。每只動(dòng)物每天訓(xùn)練4次,,實(shí)驗(yàn)之間的間隔10-15s到5-15min都可以,,訓(xùn)練5天(如table 1,獲得性訓(xùn)練的平臺(tái)在SW,,逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練的平臺(tái)在NE),,連續(xù)訓(xùn)練至小鼠找到平臺(tái)的時(shí)間低于15s,。

探查訓(xùn)練:最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,將平臺(tái)撤除,,開始60s的探查訓(xùn)練,。將動(dòng)物由原先平臺(tái)象限的對(duì)側(cè)放入水中。記錄動(dòng)物在目標(biāo)象限(原先放置平臺(tái)的象限)所花的時(shí)間和進(jìn)入該象限的次數(shù),以此作為空間記憶的檢測(cè)指標(biāo),。

逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練:測(cè)定動(dòng)物的工作記憶(working memory),。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開始逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練,。將平臺(tái)放在原先平臺(tái)所在象限的相反象限,,方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次,。每次記錄找到平臺(tái)的時(shí)間和游泳距離以及游泳速度,。

逆轉(zhuǎn)探查訓(xùn)練:最后一次逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練的第二天進(jìn)行,方法與上述探查訓(xùn)練類似,;記錄動(dòng)物60s內(nèi)動(dòng)物在目標(biāo)象限(平臺(tái)第二次所在區(qū))所花時(shí)間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù),。學(xué)習(xí)和記憶能力評(píng)估:記錄測(cè)試小鼠在每個(gè)象限中花費(fèi)的時(shí)間百分比、在訓(xùn)練過的平臺(tái)位置上經(jīng)過的次數(shù),、在未訓(xùn)練的象限中的相應(yīng)區(qū)域中花費(fèi)的時(shí)間和游泳速度,。通過記錄測(cè)試小鼠在每個(gè)象限中花費(fèi)的時(shí)間、在訓(xùn)練的平臺(tái)位置上的經(jīng)過次數(shù)和在未訓(xùn)練的象限中的類似位置所花費(fèi)的時(shí)間進(jìn)行比較來評(píng)估探索試驗(yàn)中測(cè)試小鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力,。

(十一)前脈沖抑制實(shí)驗(yàn)

?前脈沖抑制實(shí)驗(yàn)(Prepulse Inhibition,,PPI)是一種感覺運(yùn)動(dòng)門控的測(cè)量方法,中樞神經(jīng)系統(tǒng)天然具有過濾和篩選信息的能力,,以保證思維的連貫性,,這個(gè)機(jī)制稱為感覺運(yùn)動(dòng)門控。精神分裂癥具有感覺運(yùn)動(dòng)門控失調(diào)或前脈沖抑制缺失的現(xiàn)象,,PPI被認(rèn)為是建立精神分裂癥動(dòng)物模型一個(gè)重要的基礎(chǔ),。PPI是指在一個(gè)較強(qiáng)的驚跳刺激之前約30-500毫秒(ms)預(yù)先給予一個(gè)較弱的刺激可以抑制對(duì)驚跳刺激的反應(yīng)程度。本研究中PPI的檢測(cè)使用SR-LAB驚跳反射檢測(cè)系統(tǒng)(San Diego Instruments,,San Diego, CA),。PPI實(shí)驗(yàn)共42個(gè)測(cè)試(trials):包括6個(gè)驚跳測(cè)試(Pulse-alone,120dB),,前脈沖刺激和驚跳強(qiáng)刺激聯(lián)合測(cè)試(Prepulse+Pulse,,74-120dB,78-120dB,, 82-120dB,,86-120dB, 90-120dB)各6個(gè),,6個(gè)無刺激測(cè)試(70dB),。在實(shí)驗(yàn)之前,將每只小鼠在背景白噪聲(背景噪聲70 dB,,此強(qiáng)度下的噪聲可以較好地掩蓋實(shí)驗(yàn)室環(huán)境噪聲)下適應(yīng)有機(jī)玻璃圓柱體5min,。隨后是42個(gè)測(cè)試以隨機(jī)順序出現(xiàn),,平均間隔為15s。測(cè)試共有7種類型:測(cè)試1(120dB),,持續(xù)40ms,;測(cè)試2-6(5種前脈沖強(qiáng)度分別為74dB,78dB,, 82dB,,86dB,,90dB,,前脈沖持續(xù)20ms,然后是100ms的間隔,,再出現(xiàn)120dB驚跳強(qiáng)刺激,,持續(xù)時(shí)間40ms);測(cè)試7,,70 dB背景噪聲,;7類測(cè)試均出現(xiàn)6次。記錄驚嚇反應(yīng)65ms,,從驚嚇刺激開始每隔1ms測(cè)量一次,。在65ms采樣窗口內(nèi)記錄的最大驚嚇幅度(mV_Max)作因變量。由每個(gè)前預(yù)脈沖強(qiáng)度引起的PPI的百分比(PPI%)計(jì)算為[1-(平均Prepulse+Pulse的反應(yīng)幅度)/(平均Pulse-alone的反應(yīng)幅度)]×100%,。

 


總結(jié) 

靈賦拓普生物擁有大小鼠行為學(xué)平臺(tái),,提供充分的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)空間,專業(yè)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)備及記錄分析系統(tǒng),,可提供水迷宮,、新物體識(shí)別、Y迷宮,、轉(zhuǎn)棒,、曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳,、高架十字迷宮等全套測(cè)試設(shè)備,。平臺(tái)有專業(yè)博士指導(dǎo),歡迎廣大客戶致電咨詢:0755-86325431,,我們竭誠(chéng)為您服務(wù),。