一心腦血管疾病動(dòng)物模型

（一）經(jīng)典模型

1.心肌梗死模型(MI,myocardial infarction)

2.大腦中動(dòng)脈阻塞模型（MCAO,middle cerebral artery occlusion）

3.主動(dòng)脈弓縮窄模型(transverse aoritc constriction)

4.動(dòng)脈粥樣硬化模型（atherosclerosis）

（二）心腦血管動(dòng)物模型其他疾病模型

1.腹主動(dòng)脈血管移植模型(AAVT,abdominal aortic vascular transplantation)

2.高脂血癥（HLP,hyperlipidaemia）

3.動(dòng)靜脈內(nèi)瘺模型（arteriovenous）等

二心肌梗死模型

心肌梗死(myocardial infarction,，MI)是一種嚴(yán)重的心血管疾病,，由于冠狀動(dòng)脈血供急劇減少或中斷,，使心肌持續(xù)性缺血缺氧以致壞死,，損害心功能且可能導(dǎo)致心律失常,、休克以及心力衰竭等嚴(yán)重后果,。

目前建立心肌梗死動(dòng)物模型的方法有多種,，包括：冠脈結(jié)扎法,、藥物法、栓塞法,、左室電灼法,、液氮冷凍法等[1,2],。其中藥物法主要通過(guò)舌下靜脈注射垂體后葉素誘發(fā)血管痙攣促使心肌缺血梗死；后三種方法可直接形成冠脈閉塞,，但對(duì)輔助設(shè)備要求高,，操作難度大；冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法操作成熟簡(jiǎn)便,，梗阻部位明確易于判斷,，既符合心梗發(fā)生的實(shí)際病理過(guò)程，又便于開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究,，故主要采用此法建立心梗模型,。

造模方法：冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎

觀察指標(biāo)：心臟B超檢測(cè) EF及左心室舒張末內(nèi)徑（LVEDD）和左室收縮末內(nèi)徑（LVESD）；Masson染色或天狼星紅染色觀察心肌組織纖維化情況,，伊文思藍(lán)-TTC染色觀察梗死面積,；HE染色觀察病理；ELISA檢測(cè)血清中的TNF-α,、IL-1β及IL-6等炎癥因子,。

三動(dòng)脈粥樣硬化模型

動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是引起多種心血管疾病模型的病理生理基礎(chǔ)和主要原因，表現(xiàn)為大中型動(dòng)脈中緩慢脂質(zhì)堆積形成斑塊,，并伴有慢性炎癥反應(yīng),。根據(jù)動(dòng)物脂質(zhì)代謝情況、操作簡(jiǎn)易程度,，選擇轉(zhuǎn)基因小鼠作為建立動(dòng)脈粥樣硬化模型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物較為理想,。在建模過(guò)程中，可以考慮給予高脂高膽固醇飼料促進(jìn)脂質(zhì)吸收,，形成炎癥反應(yīng)等影響動(dòng)脈粥樣硬化形成的各種因素，尋求一種快速,、方便,、有效的模型建立方法。

觀察指標(biāo)：體重,，血脂四項(xiàng),，全主動(dòng)脈大體油紅O染色，主動(dòng)脈病理學(xué)檢查等

 部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

四腦梗模型

腦血管疾病目前已成為我國(guó)第一大致殘和第二大致死的疾病,，全國(guó)每年 250 萬(wàn)新發(fā)腦血管病例,，其中腦梗塞高達(dá) 60%，因此,，深入研究,，減少后遺癥，已成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要研究課題,。腦梗后,，內(nèi)源性炎癥過(guò)程立即上調(diào),，導(dǎo)致局部神經(jīng)炎癥和腦組織破壞加劇。最早在腦缺血后24小時(shí)觸發(fā)先天性免疫反應(yīng),，隨后激活適應(yīng)性免疫,。這些免疫細(xì)胞共同產(chǎn)生許多炎癥介質(zhì)，即細(xì)胞因子,、生長(zhǎng)因子和趨化因子,。

造模方法：線栓法（插線法）

觀察指標(biāo)：TTC染色，Longa 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分5分制（1-3分,，模型成功）,；病理染色，ELISA檢測(cè)血清中的TNF-α,、IL-1β及IL-6等炎癥因子,。

神經(jīng)學(xué)行為評(píng)分（評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為5分制）

小鼠自由活動(dòng)時(shí)身體會(huì)明顯向其右側(cè)方向側(cè)重傾斜，且會(huì)間斷性甚至持續(xù)右向側(cè)跌倒,。（3分）靈賦拓普生物動(dòng)物行為學(xué)平臺(tái)可進(jìn)行大小鼠行為學(xué)測(cè)試,，并有專(zhuān)業(yè)博士進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)。

五其他模型

主動(dòng)脈弓縮窄模型（transverse aortic constriction, TAC）最早由Rockman等于1991年正式建立,，是慢性心室肥大最常用的疾病模型,，用于模擬高血壓或室內(nèi)壓增高而引起的肥厚性心肌病、心衰,。TAC術(shù)后,，主動(dòng)脈弓部定量的縮窄引起主動(dòng)脈血流受阻，左心室壓力負(fù)荷增加,，誘發(fā)了左心室的心室肥厚,，早期以向心性肥厚為主，心功能可有效代償,，隨著時(shí)間的延續(xù),，進(jìn)行性發(fā)展為心腔的擴(kuò)張，最終發(fā)展為心力衰竭,。

根據(jù)動(dòng)物品系,、基因型和手術(shù)縮窄程度的不同，心室肥厚和心衰的進(jìn)程不同,?？s窄針通常由針頭制成。一般來(lái)說(shuō),，使用27G的針頭（中度縮窄）,，TAC術(shù)后2周可發(fā)展為顯著性的心室肥厚，4-6周發(fā)展為心力衰竭,；使用28G的針頭（重度縮窄）,，TAC術(shù)后1周可發(fā)展為顯著性的心室肥厚,，2-3周發(fā)展為心力衰竭。

造模方法：

實(shí)驗(yàn)鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,。術(shù)前禁食12 h(不禁水),。將實(shí)驗(yàn)鼠放進(jìn)連接好的麻醉機(jī)誘導(dǎo)箱進(jìn)行麻醉。實(shí)驗(yàn)鼠頸部至前胸手術(shù)區(qū)域常規(guī)備皮,，碘伏消毒術(shù)區(qū),。頸、胸部正中開(kāi)胸,，鈍性分離肌肉,，撐開(kāi)器撐開(kāi)切口，剝離胸腺,、暴露主動(dòng)脈弓部,。

沿主動(dòng)脈弓尋找無(wú)名動(dòng)脈、左頸總動(dòng)脈,、左鎖骨下動(dòng)脈,，在右無(wú)名動(dòng)脈與左頸總動(dòng)脈兩者之間穿線，同時(shí)平行于主動(dòng)脈弓上方放置縮窄用的針頭（根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康募皩?shí)驗(yàn)動(dòng)物基因型的不同,，綜合考慮并選擇縮窄的程度）并打結(jié),，將線扎緊后緩緩抽出用于縮窄的針頭，即在主動(dòng)脈弓部形成定量縮窄,。

關(guān)閉胸腔,，將頸部和胸部的皮膚縫合，碘伏消毒,。繼續(xù)通氣15 min,。待大鼠恢復(fù)自主呼吸后，解除呼吸機(jī)供氣,。術(shù)后連續(xù)3天肌肉注射青霉素殺菌抗感染,。

模型評(píng)價(jià)

圖注：TAC造模前心電圖

圖注：TAC模型心電圖

圖注：模型前正常SD大鼠B超圖

圖注：TAC模型4周后心電圖

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