脊髓（spinal cord）呈微扁圓柱體，位于椎管內(nèi),，為腦干向下延伸部分,。脊髓由含有神經(jīng)細(xì)胞的灰質(zhì)和含上、下行傳導(dǎo)束的白質(zhì)組成,。脊髓發(fā)出31對脊神經(jīng)分布到四肢和軀干,；同時(shí)也是神經(jīng)系統(tǒng)的初級反射中樞。正常的脊髓活動是在大腦的控制下完成的,。

在與脊髓相關(guān)的小鼠實(shí)驗(yàn)中,，對脊髓標(biāo)本要求的不用決定了采集方法的不同，現(xiàn)在介紹一下沖洗脊髓采集法（此法適用僅需要完整脊髓,，無需顧及神經(jīng)根）,，此方法快速且損傷小。

一、器械與耗材

5ML注射器,，剪刀,，鑷子，直徑10cm培養(yǎng)皿,，白色槍頭,，生理鹽水

二、操作辦法

（1）將小鼠用二氧化碳安樂死,；

（2）將脊柱剪下,，前至寰椎-枕骨大孔，后抵腰骶關(guān)節(jié),；

（3）在寰椎脊髓腔口9點(diǎn),、3點(diǎn)、6點(diǎn)和12點(diǎn)處,，縱深剪開0.5mm,；

（4）用鑷子夾住腰端，取白色槍頭稍稍剪開頭部,，替換5ML注射器針頭,，將5ML注射器充滿生理鹽水。于腰椎斷端,，將槍頭部位向近端旋轉(zhuǎn)插入脊髓腔,，槍頭孔完全插入脊髓腔內(nèi)2mm；

（5）快速注射,，將脊髓完整沖出脊髓腔,；

三、結(jié)果展示

四,、注意事項(xiàng)

 操作時(shí)注意保護(hù)脊髓,。一旦脊髓損傷，將無法被完整吹出,。因此絕不可用斷頸法處死小鼠,，因?yàn)檫@樣做必然傷及腰椎，使得沖洗時(shí)沖洗液從腰椎脊髓腔破損部位溢出,，不能形成有效沖擊力,。

五、動物脊髓損傷模型分類

1,、挫傷型

重物墜擊器：Allen AR于1911年使用重物墜擊法( WD法) 構(gòu)建脊髓背側(cè)損傷模型。該技術(shù)原理為一定質(zhì)量的物體從限定高度自由降落,，撞擊脊髓,，其致傷程度可通過控制重物質(zhì)量和墜落高度來調(diào)節(jié)，利用該方法能復(fù)制出不同程度的脊髓損傷模型。

電磁打擊器：通過應(yīng)用步進(jìn)電動機(jī),、計(jì)算機(jī),、傳感器、脊柱磁夾固定,，打擊器 ( infinite horizon,，IH) 能精確控制打擊力度。傳感器能直接測量打擊裝置對脊髓的壓力,，當(dāng)達(dá)到預(yù)先設(shè)定的壓力時(shí),，打擊接頭會自動撤回，從而避免重物墜擊器出現(xiàn)的反彈現(xiàn)象,。然而,，脊柱固定的多變性是其最大的缺陷。

2,、壓迫型

在臨床中,，椎體骨折脫位、爆裂骨折等對脊髓的損傷往往是持續(xù)性壓迫所致,。壓迫型脊髓損傷模型往往通過動脈鉗夾,、絲線環(huán)扎/解壓、氣囊等方式對脊髓造成壓迫,，與挫傷型脊髓損傷模型的區(qū)別在于脊髓存在長時(shí)間的擠壓,。

3、缺血損傷型

制作該模型的方法主要有: 血管栓塞法,、血管夾閉法,、電凝灼閉法等。王正峰等通過夾閉胸主動脈時(shí)間 8,、10,、12 min 制備小鼠脊髓缺血模型，確定 10 min為最佳夾閉時(shí)間,，該動物模型可以長期存活,，有利于研究脊髓缺血損傷長時(shí)間內(nèi)的動態(tài)變化。金華等改良大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型,，通過電凝腎上腹主動脈發(fā)出的椎動脈和結(jié)扎腎下腹主動脈 60 min,、90 min、120 min 后再灌注,，該方法能夠有效阻斷腰段脊髓血液供應(yīng),。Chen RK 等通過雙極電凝器電凝大鼠脊髓背側(cè)中央靜脈制作脊髓缺血損傷模型，該模型較以往單電極能有效限制過度熱擴(kuò)散,，減少鄰近脊髓組織損傷,，模型制作一致性較強(qiáng),。

4、橫斷損傷型

完全橫斷或部分橫斷脊髓損傷模型廣泛應(yīng)用于組織工程脊髓損傷后的再生修復(fù),。該模型有利于評估軸突的再生能力和脊髓的功能恢復(fù)以及神經(jīng)遞質(zhì),、神經(jīng)營養(yǎng)因子等對這一過程的影響及作用。

2012年,，胡煒等通過自制定量半橫斷刀制作大鼠半橫斷狀缺損模型,，該定量半橫斷刀較手術(shù)刀更銳利，能有效減少對脊髓對側(cè)的擠壓及牽拉傷,，同時(shí)縱切刀的長度固定,，切割的組織長度一致，避免了人為誤差,，術(shù)后觀察對大鼠死亡率,、電生理檢測、組織形態(tài)學(xué)及運(yùn)動功能進(jìn)行對比分析,，結(jié)果表明經(jīng)定量半橫斷刀制備大鼠脊髓半橫斷損傷模型,，制作過程重復(fù)性好且制成的模型穩(wěn)定，是研究脊髓半橫斷損傷的理想模型,。