大鼠動脈粥樣硬化模型
動脈粥樣硬化(AS)是一種慢性動脈疾病,可引起冠心病和腦梗死等,,是嚴(yán)重危害人類健康的常見病,,在發(fā)達(dá)國家動脈粥樣硬化性心血管疾病被稱為“頭號殺手”。動脈粥樣硬化大鼠模型的建立是研究和控制該疾病的必要手段,,因此建立一種脂質(zhì)代謝和斑塊與人類相似的實驗性動脈粥樣硬化大鼠模型具有重要的意義,。
幾種常見造模方法
1.1 喂養(yǎng)法建立AS模型
1)單純高脂飼料制備AS模型
動脈粥樣硬化的發(fā)生是血漿中脂質(zhì)沉積在動脈內(nèi)膜并刺激結(jié)締組織增生的結(jié)果,因此在建立AS模型之前,,首先是建立一個高脂血癥模型,,而大多數(shù)AS模型是建立在高脂飲食基礎(chǔ)上的(SD大鼠用D12109c高脂飼料喂養(yǎng),對照組用d12102c飼料喂養(yǎng)),,通常喂養(yǎng)10周后再冠狀動脈出現(xiàn)粥樣硬化板塊,。
高脂飼料建立AS模型的優(yōu)點是操作簡單,成本低廉,,易飼養(yǎng),,所以目前仍是研究AS動物模型的常用方法,,但弊端是喂養(yǎng)周期長,病變不穩(wěn)定,。
2)高脂飼料加維生素D制備AS模型
由于大鼠無膽囊,,對膽固醇等脂質(zhì)吸收少,單純的高脂飼料只能產(chǎn)生脂質(zhì)沉積,,很難誘導(dǎo)大鼠AS的形成,,因此高脂飼料聯(lián)合一些可以加速AS形成的藥物共同作用,可提高制備效率,。研究表明,,動脈粥樣硬化的血管壁中含有大量的鈣,其含量與冠心病的病變程度呈正相關(guān),,因此過量的維生素D可加速AS的形成,。
通常可采用高脂飼料喂養(yǎng)加腹腔注射VD,,7周后可成功復(fù)制大鼠動脈粥樣硬化模型,;也可以通過高脂飼料喂養(yǎng)加肌注注射VD和尼guding灌胃(nigu丁可造成內(nèi)膜的損傷,內(nèi)彈力板的斷裂),,4周后有明顯的動脈粥樣斑塊形成,。
該法簡單易行,成本低廉,,克服了單純高脂飼料喂養(yǎng)法復(fù)制AS模型中穩(wěn)定性差及周期長的缺點,,且操作簡單,便于大面積推廣,。
1.2 機(jī)械損傷法制備AS模型
研究人員在飼料致血脂紊亂的基礎(chǔ)上加手術(shù)直接作用,,制備AS模型。
球囊損傷術(shù)制備AS模型
球囊損傷術(shù)主要造成內(nèi)皮細(xì)胞的即刻剝脫,,彈力版及中膜損傷,。將充滿生理鹽水的塑料球囊導(dǎo)管放入頸總動脈(也可以在腹主動脈或髂動脈),來回拉動3次,,再加以高脂飼料,,28天后出現(xiàn)明顯的動脈硬化病變。此法可造成嚴(yán)重的內(nèi)彈力板和中膜損傷,,所以造模過程中要注意球囊和血管直徑的比例,,且操作時應(yīng)輕柔,以免造成其他血管的損傷,。
移植法制備AS模型
器官移植導(dǎo)致的動脈粥樣硬化是器官移植患者長期生存的主要瓶頸,,它的組織學(xué)變化源自慢性排斥反應(yīng)。將SD大鼠的腹主動脈冷缺血原位腹主動脈移植,術(shù)后10周見內(nèi)膜明顯增厚,,由此可見行腹主動脈移植,強(qiáng)化冷缺血損傷,,造成移植物動脈粥樣硬化的發(fā)生,。
2.AS模型的鑒定方法
2.1體重變化:
研究表明,SD大鼠對照組喂養(yǎng)前體重約180g左右,,喂養(yǎng)后體重增長至220g左右,;AS模型組喂養(yǎng)前體重約180g左右,喂養(yǎng)后體重增長至500g左右,,差異顯著,。
2.2血清生化(血脂4項)
采集對照組和模型組全血并分離血清,用小動物生化儀檢測總膽固醇(TC),,甘油三酯(TG),,高密度脂蛋白(HDL-C),低密度脂蛋白(LDL-C),結(jié)果顯示TC,、TG和LDL-C明顯有差異,。
2.3.動脈血管大體油紅O染色
取SD大鼠頸總動脈(冠狀動脈或腹主動脈等),做大體油紅O染色,,可見明顯動脈硬化斑塊,。
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