一、眼部解剖結(jié)構(gòu)
小鼠眼部解剖包括兩個部分:眼球和眼附屬器官,。
(一)眼球
眼球是相對復(fù)雜的器官,呈球形,,直徑僅約3mm,。小鼠眼球的細(xì)致結(jié)構(gòu)與人眼多有不同。兩只眼球左右各一,,眼軸斜向前外方向,。由于眼眶淺,部分眼球突出于眼眶之外,。
眼球分為3個腔:前房,、后房與玻璃體腔。
眼球壁分為3層:外層為角膜和鞏膜,;中層為葡萄膜,,包括虹膜、睫狀體和脈絡(luò)膜;內(nèi)層為視網(wǎng)膜,。眼球內(nèi)還有晶狀體和玻璃體,。
(二)眼附屬器官
包括:眼瞼、結(jié)膜,、眼眶,、眼眶靜脈竇、眼外肌,、淚腺,、哈氏腺、神經(jīng)和血管等,。
二,、小鼠視網(wǎng)膜采集背景
視覺對于人是一種很重要的感覺,通過視覺我們可以獲得對機(jī)體生存具有重要意義的各種信息,。視覺系統(tǒng)的重要組成部分之一就是視網(wǎng)膜,,其病變可直接影響視力。因此,,對視網(wǎng)膜的研究是一個重要的科學(xué)目標(biāo),。
如今,小鼠越來越多地被用作人類視網(wǎng)膜疾病的動物模型,,人們利用小鼠模型來研究視網(wǎng)膜疾病并了解特定基因的作用,。
視網(wǎng)膜色素上皮和神經(jīng)上皮之間聯(lián)系不緊密。在眼壓下降到一定程度,,會產(chǎn)生視網(wǎng)膜脫離,,即為視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層與色素上皮層脫離。利用這個病理現(xiàn)象,,瞬間降低眼壓,,可以迅速便捷地采集完整的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮。
三器械與耗材
小鼠的完整視網(wǎng)膜采集所需器械與耗材:
1.顯微鑷
2.顯微剪
3.顯微鏡
4.培養(yǎng)皿
5.刀片
6.麻藥
7.生理鹽水
四操作方法
1.將小鼠深度麻醉,;
2.右手拉緊小鼠左面頰皮膚,,使左眼球突出眼眶外,;
3.左手使用平鑷夾住眼球后極,,令眼球內(nèi)壓增高;
4.右手用單刃刀片猛然從正中將角膜劃開半周,;
5.房水突然流出,,巨大的晶狀體從切開的角膜裂隙中脫離出來,眼內(nèi)壓驟然下降,,造成急性視網(wǎng)膜脫離,;
6. 持續(xù)夾緊眼球后的視神經(jīng)索,拉斷視神經(jīng)和眼動脈,,摘取被切開的眼球,;
7. 將眼球置于培養(yǎng)皿中,,放在體視鏡下觀察;可見視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層,、血管膜,、鞏膜和外眼肌,;
8.用顯微剪將視網(wǎng)膜邊緣環(huán)形剪開,,可獲得完整的視網(wǎng)膜。
五,、注意事項(xiàng)與技術(shù)討論
1.切眼球時盡量沿著眼球直徑切開,;
2.速度盡量快。
六,、知識考核
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