一,、眼部解剖結(jié)構(gòu)
小鼠眼部解剖包括兩個(gè)部分:眼球和眼附屬器官,。
(一)眼球
眼球是相對(duì)復(fù)雜的器官,,呈球形,,直徑僅約3mm,。小鼠眼球的細(xì)致結(jié)構(gòu)與人眼多有不同,。兩只眼球左右各一,,眼軸斜向前外方向。由于眼眶淺,,部分眼球突出于眼眶之外,。
眼球分為3個(gè)腔:前房、后房與玻璃體腔,。
眼球壁分為3層:外層為角膜和鞏膜,;中層為葡萄膜,包括虹膜,、睫狀體和脈絡(luò)膜,;內(nèi)層為視網(wǎng)膜。眼球內(nèi)還有晶狀體和玻璃體,。
(二)眼附屬器官
包括:眼瞼,、結(jié)膜、眼眶,、眼眶靜脈竇,、眼外肌、淚腺,、哈氏腺,、神經(jīng)和血管等。
二,、小鼠視網(wǎng)膜采集背景
視覺對(duì)于人是一種很重要的感覺,,通過視覺我們可以獲得對(duì)機(jī)體生存具有重要意義的各種信息。視覺系統(tǒng)的重要組成部分之一就是視網(wǎng)膜,,其病變可直接影響視力,。因此,對(duì)視網(wǎng)膜的研究是一個(gè)重要的科學(xué)目標(biāo),。
如今,,小鼠越來越多地被用作人類視網(wǎng)膜疾病的動(dòng)物模型,人們利用小鼠模型來研究視網(wǎng)膜疾病并了解特定基因的作用。
視網(wǎng)膜色素上皮和神經(jīng)上皮之間聯(lián)系不緊密,。在眼壓下降到一定程度,,會(huì)產(chǎn)生視網(wǎng)膜脫離,即為視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層與色素上皮層脫離,。利用這個(gè)病理現(xiàn)象,,瞬間降低眼壓,可以迅速便捷地采集完整的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮,。
三器械與耗材
小鼠的完整視網(wǎng)膜采集所需器械與耗材:
1.顯微鑷
2.顯微剪
3.顯微鏡
4.培養(yǎng)皿
5.刀片
6.麻藥
7.生理鹽水
四操作方法
1.將小鼠深度麻醉,;
2.右手拉緊小鼠左面頰皮膚,使左眼球突出眼眶外,;
3.左手使用平鑷夾住眼球后極,,令眼球內(nèi)壓增高;
4.右手用單刃刀片猛然從正中將角膜劃開半周,;
5.房水突然流出,,巨大的晶狀體從切開的角膜裂隙中脫離出來,眼內(nèi)壓驟然下降,,造成急性視網(wǎng)膜脫離,;
6. 持續(xù)夾緊眼球后的視神經(jīng)索,拉斷視神經(jīng)和眼動(dòng)脈,,摘取被切開的眼球,;
7. 將眼球置于培養(yǎng)皿中,放在體視鏡下觀察,;可見視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層,、血管膜、鞏膜和外眼??;
8.用顯微剪將視網(wǎng)膜邊緣環(huán)形剪開,可獲得完整的視網(wǎng)膜,。
五,、注意事項(xiàng)與技術(shù)討論
1.切眼球時(shí)盡量沿著眼球直徑切開;
2.速度盡量快,。
六,、知識(shí)考核
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