氣管滴注/氣管插管這一給藥方式具有給藥量準(zhǔn)確、動物應(yīng)激小等優(yōu)點而廣泛應(yīng)用于肺相關(guān)疾病造模,。常見的慢阻肺造模方法有:
如何進行氣管滴注,?
Step1:滴注前準(zhǔn)備
動物:♀ ♂均可,6-8w,,balb/c,、C57BL/6J均可其他用品:麻醉機(含異氟烷)、鼠板,、10-100ul移液槍,、棉簽、小鼠壓舌燈,、鑷子,、皮筋等。
Step2:將動物置于誘導(dǎo)箱中麻醉,,然后放在鼠板上用皮筋固定門齒和腹部(皮筋可以用乳膠手套上的那根,,柔軟且彈力適中)。
Step3:鑷子拉出小鼠舌頭,,插入棉簽,,以沾干口腔內(nèi)的唾液,否則過多的唾液容易遮擋視線,,不利于觀察到開合的聲門。
Step4:手指捏住舌頭,,伸入壓舌燈,,觀察聲門開合的位置
Step5:向聲門緩慢滴加10-40ul藥物
Step6:藥物滴加完成后,用無針頭的注射器從鼻孔向下緩慢推大約500ul空氣,,使藥物均勻分布,。
Step7:將給藥后的鼠放在耳邊,可聽到清晰的呼吸音,類似于人咳嗽或“咯痰”聲,,說明給藥成功,。鼠放回鼠籠,1min內(nèi)即可蘇醒,。
模型評價
以黑墨水示意藥物分布,,可以看到左右肺葉均有著色。
根據(jù)藥物毒性或小鼠對藥物的反應(yīng)不同可以發(fā)現(xiàn),,有的小鼠在給藥后會出現(xiàn)體重下降,、毛發(fā)凌亂等問題,這些現(xiàn)象也可以從側(cè)面反映出藥物對小鼠發(fā)揮了作用,。
取材
分子水平 | 肺泡灌洗液 | 檢測細胞因子,,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平,反應(yīng)炎癥水平 |
病理水平 | 肺葉,、氣管 | HE染色,,直觀 |
小tips:
小鼠在自然體位下,食管和氣管是并行的,,食管貼近背部,,氣管貼近胸部,因此在灌胃時需要灌胃針從嘴角進針,,貼住上顎然后下行,。而氣管給藥時需要向胸部貼近才能看到聲門。給藥工具除了移液槍外,,還可以選擇灌胃針進行氣管給藥,,此時灌胃針在氣管中上下移動時可感覺到氣管沒有食管那么光滑,進而進一步判斷給藥位置,。