氣管滴注/氣管插管這一給藥方式具有給藥量準(zhǔn)確、動(dòng)物應(yīng)激小等優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于肺相關(guān)疾病造模,。常見(jiàn)的慢阻肺造模方法有:
如何進(jìn)行氣管滴注,?
Step1:滴注前準(zhǔn)備
動(dòng)物:♀ ♂均可,,6-8w,,balb/c、C57BL/6J均可其他用品:麻醉機(jī)(含異氟烷),、鼠板,、10-100ul移液槍、棉簽,、小鼠壓舌燈,、鑷子、皮筋等,。
Step2:將動(dòng)物置于誘導(dǎo)箱中麻醉,,然后放在鼠板上用皮筋固定門(mén)齒和腹部(皮筋可以用乳膠手套上的那根,柔軟且彈力適中),。
Step3:鑷子拉出小鼠舌頭,,插入棉簽,以沾干口腔內(nèi)的唾液,,否則過(guò)多的唾液容易遮擋視線(xiàn),,不利于觀察到開(kāi)合的聲門(mén)。
Step4:手指捏住舌頭,,伸入壓舌燈,,觀察聲門(mén)開(kāi)合的位置
Step5:向聲門(mén)緩慢滴加10-40ul藥物
Step6:藥物滴加完成后,用無(wú)針頭的注射器從鼻孔向下緩慢推大約500ul空氣,,使藥物均勻分布,。
Step7:將給藥后的鼠放在耳邊,可聽(tīng)到清晰的呼吸音,,類(lèi)似于人咳嗽或“咯痰”聲,,說(shuō)明給藥成功。鼠放回鼠籠,1min內(nèi)即可蘇醒,。
模型評(píng)價(jià)
以黑墨水示意藥物分布,,可以看到左右肺葉均有著色。
根據(jù)藥物毒性或小鼠對(duì)藥物的反應(yīng)不同可以發(fā)現(xiàn),,有的小鼠在給藥后會(huì)出現(xiàn)體重下降,、毛發(fā)凌亂等問(wèn)題,這些現(xiàn)象也可以從側(cè)面反映出藥物對(duì)小鼠發(fā)揮了作用,。
取材
分子水平 | 肺泡灌洗液 | 檢測(cè)細(xì)胞因子,,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平,反應(yīng)炎癥水平 |
病理水平 | 肺葉,、氣管 | HE染色,,直觀 |
小tips:
小鼠在自然體位下,食管和氣管是并行的,,食管貼近背部,,氣管貼近胸部,因此在灌胃時(shí)需要灌胃針從嘴角進(jìn)針,,貼住上顎然后下行,。而氣管給藥時(shí)需要向胸部貼近才能看到聲門(mén)。給藥工具除了移液槍外,,還可以選擇灌胃針進(jìn)行氣管給藥,,此時(shí)灌胃針在氣管中上下移動(dòng)時(shí)可感覺(jué)到氣管沒(méi)有食管那么光滑,進(jìn)而進(jìn)一步判斷給藥位置,。