自身不得糖尿??？小型豬糖尿病模型構(gòu)建、驗(yàn)證看這里,！
近年來,，小型豬（minipig）在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用快速增長,，且遺傳修飾豬模型用于糖尿病研究和其他轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究發(fā)展迅猛。單純高脂飲食可在豬中誘發(fā)肥胖和糖耐量異常等表型,，但一般不會導(dǎo)致糖尿病,，需要聯(lián)合應(yīng)用其他手段破壞胰島β細(xì)胞，比如鏈唑霉素,、四氧嘧啶和基因修飾技術(shù)等,。為便于小型豬在糖尿病研究領(lǐng)域的推廣和應(yīng)用,，靈賦拓普結(jié)合自身在動物科研多年從業(yè)經(jīng)驗(yàn)，分享此篇小型豬糖尿病模型,。
由于豬沒有自發(fā)的糖尿病,，必須通過外科手術(shù)或化學(xué)藥物來誘發(fā)1型糖尿病。STZ對胰島β細(xì)胞具有選擇性毒性作用,，對動物機(jī)體組織的毒性相對較小,，動物存活率高，是目前廣泛采用的制備動物糖尿病模型的藥物,。
小型豬糖尿病模型
一,、實(shí)驗(yàn)材料： (1)實(shí)驗(yàn)動物：巴馬小型豬，18-22kg,，雄性,，6只； (2)實(shí)驗(yàn)材料:鏈脲佐菌素( streptozotocin,，STZ),，血糖儀及試紙，胰島素試劑盒,，舒泰50,； (3)客戶需求：靈賦拓普提供飼養(yǎng)場地及采購動物，完成巴馬豬1型糖尿病模型建立,，安樂死及大體解剖尸體處理,。 二、實(shí)驗(yàn)方法： 糖尿病模型建立 (1)造模方式 6只巴馬小型豬采購接收后,，進(jìn)行檢疫飼養(yǎng),，實(shí)驗(yàn)日期確定后，提前24小時(shí)禁食,，造模當(dāng)天隨機(jī)抽取3只小型豬進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉,，建立耳靜脈通道，將STZ配制成50ml溶液按照150mg/KG體重劑量4min靜脈注射進(jìn)入巴馬小型豬體內(nèi),。 在應(yīng)用 STZ 后 6 h 喂飼高糖飼料,，1 kg飼料添加 400 ～ 500 g 蔗糖，避免一過性低血糖引起并發(fā)癥,。 另外3只小型豬做為對照組,，注射等量生理鹽水，正常檢測血糖及開展后續(xù)體重及糖耐實(shí)驗(yàn),。 (2)空腹血糖檢測 STZ給藥后,，分別于0h，2h,，4h,，6h,，8h，10h,，12h,，14h，16h,，18h,，20h，22h,，24h檢測血糖含量,。 STZ給藥后，分別進(jìn)行每周兩次血糖測試,，每次間隔3-4天（初步定在周二,，周五），連續(xù)檢測3周,。測血糖前要空腹,。 為確保動物存活，在血糖高于20 mmol /L時(shí)皮下注射胰島素 12U,，高于 25 mmol /L時(shí)注射 20 U,。 (3)口服糖耐測試 STZ給藥后3周，進(jìn)行糖耐量測試,，空腹口服溶于80-100ml水內(nèi)的無水葡萄糖粉25g，5分鐘內(nèi)喝完,，從口服第一口開始計(jì)算,，于口服前0h，口服后0.5h,，1h,，2h采血測試血糖含量。測試過程中,，盡量避免動物過激掙扎,。 (4)體重檢測 STZ給藥后，分別進(jìn)行每周兩次體重稱量,，每次間隔3-4天（初步定在周二,，周五），連續(xù)檢測3周,。（先稱重在測每周血糖） 糖尿病模型驗(yàn)證 當(dāng)實(shí)驗(yàn)組與對照組給藥后血糖和糖耐量實(shí)驗(yàn)有顯著性差異,，血糖穩(wěn)定在17mmol/L以上，且體重明顯下降,，則提示模型成功,。 本期分享就到這啦,，更多大小動物糖尿病模型以及動物科研相關(guān)知識歡迎致電 0755-86325431. 靈賦拓普生物竭誠為您服務(wù)。
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