本公司應(yīng)用MTT,、CCK-8比色法,,檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng),。MTT檢測(cè)原理為活細(xì)胞內(nèi)線(xiàn)粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源無(wú)色的MTT形成藍(lán)色的結(jié)晶Formazan,,并沉積在細(xì)胞中,,而死細(xì)胞無(wú)此功能,。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的Formazan,,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在一定波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量,。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),,MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。CCK-8原理與MTT類(lèi)似,,其靈敏度更高,,而且孵育后可以直接上機(jī)檢測(cè),不需要DMSO溶解,,操作更方便,。
服務(wù)內(nèi)容
1.細(xì)胞接種:收到客戶(hù)細(xì)胞后,我們會(huì)用細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),,得出細(xì)胞懸液濃度,。計(jì)算出應(yīng)稀釋的倍數(shù),按MTT或CCK-8試劑盒要求在96孔板內(nèi)接種相應(yīng)濃度的細(xì)胞懸液,;
2.細(xì)胞培養(yǎng):然后在無(wú)菌恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)接種好的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,,并實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài);
3.藥物處理并呈色:按不同濃度梯度加入藥物作用細(xì)胞,;
4.溶解,、比色:加入MTT或CCK-8,按操作要求孵育相應(yīng)時(shí)間,,在酶標(biāo)儀內(nèi)檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的吸光值,。并處理數(shù)據(jù)得出比色結(jié)果。(CCK-8孵育后可直接比色,,MTT需要加DMSO溶解紫色晶體)
服務(wù)說(shuō)明
1.客戶(hù)提供:活力旺盛的細(xì)胞和待檢測(cè)藥物(如需公司提供請(qǐng)說(shuō)明),;
2.實(shí)驗(yàn)周期:1-2周(視具體物流而定),;
3.若另有疑問(wèn)歡迎向本公司咨詢(xún),我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),。
質(zhì)量承諾
1.真實(shí)的原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),;
2.權(quán)威的實(shí)驗(yàn)報(bào)告;
3.詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,。