服務介紹
細胞克隆形成率即細胞接種存活率,,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量,。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞,??寺⌒纬陕誓軌蚍磻毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
服務內(nèi)容
1) 取對數(shù)生長期的細胞,,分別用0.25%胰酶消化并吹打成單細胞狀態(tài),;
2) 將細胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,,每組細胞分別以每皿50、100,、200個細胞的梯度密度分別接種含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕轉(zhuǎn)動,使細胞分散均勻,。將培養(yǎng)皿置于37℃,、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3周(根據(jù)細胞種類和生長狀況);
3) 經(jīng)常觀察,,當培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,,終止培養(yǎng)。棄去上清液,,用PBS小心浸洗2次,。加4%多聚甲醛固定