服務(wù)介紹
細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率,,表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量,。貼壁后的細(xì)胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞,??寺⌒纬陕誓軌蚍磻?yīng)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
服務(wù)內(nèi)容
1) 取對數(shù)生長期的細(xì)胞,,分別用0.25%胰酶消化并吹打成單細(xì)胞狀態(tài),;
2) 將細(xì)胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,每組細(xì)胞分別以每皿50,、100,、200個細(xì)胞的梯度密度分別接種含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕轉(zhuǎn)動,,使細(xì)胞分散均勻,。將培養(yǎng)皿置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3周(根據(jù)細(xì)胞種類和生長狀況),;
3) 經(jīng)常觀察,,當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng),。棄去上清液,,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定