傳統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法常常需要在不同的時(shí)間點(diǎn)宰殺實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以獲得數(shù)據(jù), 得到多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。相比之下，活體成像觀察通過(guò)采用高靈敏度制冷 CCD 配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,，對(duì)活體狀態(tài)下的生物過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行記錄，跟蹤同一觀察目標(biāo)(標(biāo)記細(xì)胞及基因)的移動(dòng)及變化，數(shù)據(jù)可信，靈敏度高,，操作安全，值得信賴,。

活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶（底物）（Luciferase）標(biāo)記細(xì)胞或 DNA,，直接CCD成像,，而熒光技術(shù)則采用綠色熒光蛋白,、紅色熒光蛋白等熒光報(bào)告基因和 FITC、Cy5,、Cy7 等熒光素及量子點(diǎn) (quantumdot,，QD) 進(jìn)行標(biāo)記，通過(guò)激發(fā)光和發(fā)射光獲取成像,。

小動(dòng)物活體熒光成像系統(tǒng)（IVIS）設(shè)備

圖注：IVIS Lumina （左）與 IVIS Spectrum（右）

操作步驟：

1,、 啟動(dòng)計(jì)算機(jī)和機(jī)器電源(機(jī)器背面)，打開(kāi)麻醉機(jī)全部開(kāi)關(guān),，將實(shí)驗(yàn)鼠麻醉,；再將麻醉的實(shí)驗(yàn)鼠放入成像倉(cāng)，擺放時(shí)注意身體成直線,，四肢全展開(kāi),；

2、點(diǎn)擊桌面 Living Imaging 軟件啟動(dòng)程序,，設(shè)置參數(shù),，獲取成像；

①點(diǎn)擊初始化按鈕,，當(dāng)溫度狀態(tài)燈由紅色變?yōu)榫G色時(shí)可進(jìn)行成像,；

②選擇成像模式：Luminescent （生物發(fā)光）或 Fluorescent（熒光）。注：生物發(fā)光成像 Excitation Filter 選擇 Block,，Emission Filter 選Open,。熒光發(fā)光選擇所需的激發(fā)和發(fā)射濾光片；

③選擇曝光參數(shù),，默認(rèn)值為 Auto（注：也可手動(dòng)調(diào)節(jié)成像參數(shù),，包括 Exposure Time曝光時(shí)間，Binning,，f/stop 光圈,，以上這些決定圖片的清晰度）。勾選 Photography攝影,，Overlay覆蓋 和Alignment Grid對(duì)齊網(wǎng)格選項(xiàng),。選擇成像視野大小：ABCD（A 適用于小鼠局部成像,，D 可同時(shí)成像 5 只小鼠）,。選擇小鼠成像高度（Subject height）通常為 1.50 cm；

④點(diǎn)擊 Acquire 按鈕獲取成像圖片,。

3,、圖片調(diào)整和圈選定量分析

在右邊工具欄的Image Adjust工具條中，去掉Individual選項(xiàng)勾選后,，標(biāo)尺將顯示出來(lái),，通過(guò)調(diào)節(jié)Aggregate Color Scale中的Min值和Max值,，改變圖中表示出的信號(hào)范圍，就可以對(duì)不同動(dòng)物間光強(qiáng)度進(jìn)行比較了,。

圈選ROI值,，如果需要靶區(qū)的光強(qiáng)數(shù)值，就需要用到ROI工具,，在圖片上建立,，點(diǎn)擊Measure ROI，顯示光強(qiáng)數(shù)值,，然后進(jìn)行定量計(jì)算,。

小動(dòng)物活體成像主要用途：

覆蓋腫瘤、干細(xì)胞,、微生物感染,、炎癥、免疫性疾病,、神經(jīng)疾病,、心血管疾病 、代謝疾病,、基因治療,、納米材料、新藥研發(fā)和植物學(xué)等研究,。

案例：

拓普生物擁有小動(dòng)物影像學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),，為您提供全方位影像學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，歡迎致電：0755-86325431 咨詢~