近年來,，終末期腎臟疾病患者數(shù)量劇增,，患者只能通過血液透析或者更換腎臟器官才能維持生命。

自體動(dòng)靜脈瘺(arteriovenous fistula,，AVF)是各指南推薦的首選血液透析通路,，但其1年通暢率僅 60%,，即使再次干預(yù)其結(jié)果和預(yù)后也不滿意。血液透析通路是血液透析患者的生命線,，維持血液透析通路的正常功能非常重要,。

動(dòng)靜脈內(nèi)瘺術(shù)是一種血管吻合術(shù)，通過吻合鄰近動(dòng)靜脈使吻合后的靜脈中流著動(dòng)脈血,，可形成血管內(nèi)瘺為血液透析提供足夠血量,。而血管內(nèi)瘺功能障礙時(shí)有發(fā)生，主要表現(xiàn)為內(nèi)瘺狹窄和血栓,，嚴(yán)重影響甚至危及患者生命安全,。故通過建立大鼠動(dòng)靜脈內(nèi)瘺模型，研究?jī)?nèi)瘺狹窄病理機(jī)制,，探究靜脈血管內(nèi)膜增生的病理變化以指導(dǎo)臨床治療和藥物研究,。

一、動(dòng)靜脈瘺模型分類

頸部動(dòng)靜脈瘺模型

腹股溝區(qū)動(dòng)靜脈瘺模型

腹部動(dòng)靜脈瘺模型

二,、操作方法  

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：

SD大鼠/Wistar大鼠,，6-8w,，雄性； 

術(shù)前準(zhǔn)備：

手術(shù)刀1把,、10cm手術(shù)剪1把,、10cm鑷子2把、電凝止血筆1個(gè),、拉鉤2個(gè),、顯微持針器1把、眼科鑷2把,，250UI/ml 肝素鈉生理鹽水,、1ml\5ml\10ml注射器、2%戊巴比妥鈉碘伏(150mg/kg),、2mm PE管,、4-0縫合線、12-0縫合線,，棉簽,、紗布、碘伏,。

術(shù)前麻醉：

將實(shí)驗(yàn)鼠放進(jìn)連接好的麻醉機(jī)誘導(dǎo)箱,，調(diào)整異氟烷濃度至5%，完成誘導(dǎo)麻醉后將實(shí)驗(yàn)鼠仰臥位固定在手術(shù)板上,，調(diào)整異氟烷濃度至2%,，連接面罩并持續(xù)吸入。手術(shù)期間氣體麻醉維持,。碘伏消毒術(shù)區(qū),。

 三、頸部動(dòng)靜脈瘺模型

常規(guī)方法：

大鼠碘伏消毒頸部,，分離右側(cè)頸外靜脈,、頸內(nèi)靜脈，結(jié)扎頸外靜脈及頸內(nèi)靜脈遠(yuǎn)心端,，離斷頸內(nèi)靜脈,，隨后分離右側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎遠(yuǎn)心端，離斷頸總動(dòng)脈,，在手術(shù)顯微鏡下12-0縫線行右側(cè)頸總動(dòng)脈－頸內(nèi)靜脈端端吻合,，觀察該段血運(yùn)情況。

套管法：

大鼠碘伏消毒頸部,，分離頸靜脈,，動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈近心端，結(jié)扎頸總動(dòng)脈分支處,，于分支處剪斷血管,，肝素鈉生理鹽水沖洗血管內(nèi),，將血管套管后，結(jié)扎套管中段,，隨后將套管伸入頸靜脈近心端,，結(jié)扎套管中段。操作完成后松開動(dòng)脈夾,，觀察該段血運(yùn)情況,。

術(shù)后觀察：

成功可見動(dòng)脈血流經(jīng)吻合口,，靜脈擴(kuò)張充盈,，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染。

模型特點(diǎn)：

1,、3～4 周的通暢率可達(dá)100%,，且死亡率僅6%；

2,、單純的切斷同側(cè)頸動(dòng)靜脈并不會(huì)引起老鼠出現(xiàn)精神癥,；

3、避免由于腹腔手術(shù)導(dǎo)致的可能感染,；

病理改變：

造瘺1周后在靜脈段就可見平滑肌細(xì)胞增殖及膠原纖維沉積,，4 周后膠原纖維和彈力纖維堆積更明顯，且出現(xiàn)靜脈內(nèi)膜增厚,、AVF狹窄等表現(xiàn),，組織化學(xué)提示靠近吻合口的新生內(nèi)膜中大量 α 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)陽性細(xì)胞,，契合了人 AVF 的病理生理改變,。

四、 腹股溝區(qū)動(dòng)靜脈瘺模型   

 常規(guī)辦法

大鼠碘伏消毒,，于大鼠腹股溝處縱行切開皮膚,，顯露股動(dòng)靜脈及其分支，行股動(dòng)靜脈端端或端側(cè)吻合,，整個(gè)手術(shù)時(shí)間約為57min,。

術(shù)后觀察：

成功可見動(dòng)脈血流經(jīng)吻合口，靜脈擴(kuò)張充盈,，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染,。

模型特點(diǎn)：

1、檢查發(fā)現(xiàn)大鼠在造模前后平均動(dòng)脈壓,、心率,、全身血流動(dòng)力學(xué)均無明顯改變；

2,、模型死亡率低,，僅為 0～15%,，主要死因?yàn)槌鲅笆车来┛祝o脈高壓導(dǎo)致的水腫或缺血是最常見的非手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥,，但發(fā)生比例均很低,；

3、存在腹腔感染的風(fēng)險(xiǎn),；

病理改變：

造模后3周的通暢率為91%,。成模后靜脈段擴(kuò)張及內(nèi)膜增生明顯，造瘺1周后炎性因子,、核因子κB和激活蛋白-1表達(dá)升高,，4周后MCP-1、PAI-1等炎癥因子也出現(xiàn)高表達(dá),，并出現(xiàn)單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)至靜脈壁的現(xiàn)象,。

 五、腹部動(dòng)靜脈瘺模型  

腎切除法：

取腹正中切口進(jìn)腹,，顯露下腔靜脈及腹主動(dòng)脈,、腎下腔靜脈，在術(shù)中切除一側(cè)腎臟,，保留腎靜脈,，使用殘留腎靜脈與腹主動(dòng)脈吻合。整個(gè)手術(shù)時(shí)間約45分鐘,。

穿刺法：

取腹正中切口進(jìn)腹,，顯露下腔靜脈及腹主動(dòng)脈、腎下腔靜脈,，在阻斷腎下腔靜脈及主動(dòng)脈后,，在腹主動(dòng)脈中下 1/3 處用18G注射針頭同時(shí)穿破腹主動(dòng)脈及下腔靜脈，通過單純縫合或生物膠配合局部壓迫達(dá)到主動(dòng)脈-腔靜脈瘺成型的效果,。

術(shù)后觀察：

成功可見動(dòng)脈血流經(jīng)吻合口,，靜脈擴(kuò)張充盈，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染,。

模型特點(diǎn)：

1,、穿刺法技術(shù)簡(jiǎn)單，可重復(fù)性高,，手術(shù)時(shí)間短,，造模結(jié)果較佳，且術(shù)后4周的死亡率能控制在10%以 下,，且AVF的通暢率達(dá)到90%,；

2、兩種方法均存在腹腔感染的風(fēng)險(xiǎn),；

病理改變：

造模后3周的通暢率為91%,。成模后靜脈段擴(kuò)張及內(nèi)膜增生明顯,，造瘺1周后炎性因子、核因子κB和激活蛋白-1表達(dá)升高,，4周后MCP-1,、PAI-1等炎癥因子也出現(xiàn)高表達(dá)，并出現(xiàn)單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)至靜脈壁的現(xiàn)象,。

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