什么是膠質(zhì)瘤,?
很多人對腦膠質(zhì)瘤不太了解,,只知道它是一種腫瘤。其實腦膠質(zhì)瘤是屬于腦腫瘤的一種,,但是它的發(fā)病率非常的高,。據(jù)資料顯示,患此病的男性多于女性,。臨床上把腦膠質(zhì)瘤分為四個級別:Ⅰ級是良性膠質(zhì)瘤,,Ⅱ級是惡性度較低的膠質(zhì)瘤,Ⅲ-Ⅳ級是高度惡性的膠質(zhì)瘤,。然而,,臨床上超一半的患者屬于Ⅳ級。膠質(zhì)瘤是大腦和脊髓膠質(zhì)細胞癌變所產(chǎn)生的,、最常見的原發(fā)性顱腦腫瘤,,亦可以稱為神經(jīng)外胚層腫瘤,或又名神經(jīng)上皮腫瘤,。起源于神經(jīng)膠質(zhì),、室管膜、脈絡叢上皮,、神經(jīng)元等,,占顱內(nèi)腫瘤40%,病因至今未明,。
目前雖采取積極地手術治療,輔以化療、放療和生物治療等,,但療效不佳,,病死率極高,因此迫切需要深入研究其生物學特性,,開展新的,、有效的輔助治療。在這些研究中,,建立相應的實驗動物模型是治療和研究膠質(zhì)瘤的關鍵,。
裸鼠皮下膠質(zhì)瘤模型構建方法
根據(jù)腫瘤接種部位的不同,接種方法可分為皮下注射及原位注射等模型,,而鑒于原位荷瘤會導致血腦屏障的破裂和反應性腦內(nèi)傷口的形成還需要精細的操作和儀器,,我們選用皮下注射成瘤。先取對數(shù)生長期細胞,,經(jīng)胰蛋白酶消化,、離心等處理后,計數(shù)細胞數(shù),,調(diào)整到所需細胞濃度,,用注射器抽取混勻的細胞懸液,接種于裸鼠右側背部靠右后肢皮下處,,建立裸鼠皮下膠質(zhì)瘤模型,。接種后每日觀察裸鼠精神、飲食,、排便及活動情況,,每隔3 天稱質(zhì)量并用游標卡尺測量并計算移植瘤平均體積,求其平均值并繪制腫瘤生長變化曲線,,觀察神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生長情況,。接種第36天處死裸鼠取出腫瘤,肉眼觀察移植瘤形態(tài),、質(zhì)地,、活動度。用福爾馬林固定腫瘤組織,,包埋,,脫蠟,染色,,觀察病理性特征,。
圖A將荷瘤的鼠腫瘤切片進行HE染色處理,荷瘤部位染色加深,,(圖中黑方框圈中的部位),,正常組織染色較淺
圖B 接種第36天裸鼠膠質(zhì)瘤組織,,肉眼可見腫瘤組織呈結節(jié)狀、灰白色,,大小形態(tài)不規(guī)則,,與周圍皮膚不粘連
影響裸鼠成瘤的關鍵因素
1.腫瘤細胞狀態(tài)
首先要考慮移植的腫瘤細胞是否能成瘤,其次是細胞接種數(shù)量,,一般不超過1×107,;不同細胞株,劑量不一樣,,一般是惡化程度越高的,,接種數(shù)量可適當減少。
2.裸鼠周齡
裸鼠周齡不要小于四周,,否則動物耐受度大大降低,,容易死亡;也不能周齡太大,,否則免疫力會增強,,不易形成腫瘤;
3.種植部位
一般選擇血供豐富區(qū)域,,如左側前肢,,血供豐富,容易生長新血管,。
膠質(zhì)瘤的動物模型對腫瘤個性化治療和藥物篩選,,具有重大的意義,同時也是研究腫瘤的新途徑,。歡迎大家關注拓普生物公眾號,,帶您了解最新動物模型資訊。
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