小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)是研究人類發(fā)病機(jī)制、評(píng)價(jià)疾病模型造模效果和新藥效果的一種重要實(shí)驗(yàn)手段,，在生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用,。小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)可以科學(xué)客觀地評(píng)價(jià)其溝通、社交,、學(xué)習(xí)和探索能力等,。

行為學(xué)實(shí)驗(yàn)均采用同窩對(duì)照原則，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠每組取 10 只左右進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，小鼠的飼養(yǎng)條件為：4-5只同性別小鼠飼養(yǎng)于底部墊鋸末碎屑的透明塑料箱,，自由飲水和喂食，飼養(yǎng)室恒溫（25±0.5℃）,、恒濕（50-60%）,、環(huán)境安靜、通風(fēng),。

在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)前由實(shí)驗(yàn)人員對(duì)小鼠進(jìn)行為期一周的撫摸,，每天5min，并且在測(cè)試前30-60 min將小鼠帶入測(cè)試室,，讓其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境,，避免搬運(yùn)過程和新環(huán)境給小鼠帶來焦慮情緒，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)保持安靜,，禁止在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處死動(dòng)物或?qū)?dòng)物進(jìn)行采血,。

(一)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

?小鼠在新異環(huán)境中對(duì)新奇事物充滿好奇，會(huì)出現(xiàn)探索行為,，但也有畏懼空曠場(chǎng)地的天性,，從而出現(xiàn)趨避行為。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(Open Field Test,，OFT)就是利用小鼠的天性,，對(duì)其緊張度和探索性行為進(jìn)行判斷,，系統(tǒng)評(píng)估小鼠的探索能力、基本運(yùn)動(dòng)能力以及焦慮行為,。

每個(gè)曠場(chǎng)試驗(yàn)箱的尺寸為40cm*40cm*35cm,，需將小鼠提前30-60min放置在實(shí)驗(yàn)區(qū)域附近。實(shí)驗(yàn)時(shí)把小鼠輕放在箱子中央,，讓小鼠在實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)自由探索30min,，用視頻軟件錄制小鼠30min內(nèi)的運(yùn)動(dòng)軌跡，并用視頻分析軟件進(jìn)一步分析小鼠在30min內(nèi)運(yùn)動(dòng)的總距離,、在中心位置停留的時(shí)間及前5min內(nèi)運(yùn)動(dòng)的總距離和在中心位置停留的時(shí)間,。在實(shí)驗(yàn)前后均用75%酒精充分擦拭實(shí)驗(yàn)裝置，避免氣味對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響,。如果小鼠更傾向于在曠場(chǎng)試驗(yàn)箱中間運(yùn)動(dòng),，解讀為抗焦慮行為，反之則為焦慮行為,。

(二)埋珠實(shí)驗(yàn)

?埋珠實(shí)驗(yàn)(Marble Burying Test)是檢測(cè)小鼠是否出現(xiàn)刻板行為的主要手段,，首先準(zhǔn)備干燥清潔的40cm*30*22cm的飼養(yǎng)盒，底部鋪5cm厚的墊料,，把準(zhǔn)備好的20顆標(biāo)準(zhǔn)玻璃珠（直徑14mm-15mm）按4列5行均等擺放在墊料上,，把小鼠輕放至盒子的同一個(gè)角，測(cè)試30min,，如果玻璃珠超過三分之二的部分被墊料覆蓋,，則認(rèn)為該玻璃珠被小鼠掩埋。記錄測(cè)試小鼠掩埋的玻璃珠數(shù)量,，數(shù)量越多,，說明小鼠越刻板。

 (三)Y迷宮實(shí)驗(yàn)

?Y迷宮實(shí)驗(yàn)（Y-maze Test）模型用來研究小鼠的空間識(shí)別記憶能力,，這種迷宮利用了小鼠對(duì)新異環(huán)境天然探究的自然習(xí)性,，不需要?jiǎng)游飳W(xué)習(xí)任何規(guī)則來趨利避害，能夠有效地反映出動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的識(shí)別記憶能力,，本實(shí)驗(yàn)采用磨砂非透明有機(jī)塑料,，按“Y”的形狀制作，分為A,，B,，C三個(gè)臂（長35cm，寬10cm,，高20cm）,，三個(gè)臂之間的夾角均為120°。實(shí)驗(yàn)開始時(shí),，把小鼠按同一方向放置在三個(gè)臂的交界處,，任其在裝置內(nèi)穿梭,，記錄5min內(nèi)小鼠進(jìn)入各臂的順序，小鼠進(jìn)入各臂三分之二及以上處記為成功進(jìn)入該臂,，否則不算進(jìn)入,。為了消除動(dòng)物之間的氣味，保證實(shí)驗(yàn)儀器的環(huán)境衛(wèi)生,，在實(shí)驗(yàn)前后均使用75% 酒精進(jìn)行擦拭,，待酒精揮發(fā)干凈再進(jìn)行下一輪實(shí)驗(yàn)，味道和殘留的酒精均會(huì)影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的行為結(jié)果,。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分析進(jìn)入各臂的順序,，按“ABC” “ACB” “BCA”“BAC”“CAB”“CBA”出現(xiàn)的形式記為正確轉(zhuǎn)換。正確轉(zhuǎn)換率=（正確轉(zhuǎn)換次數(shù)/總轉(zhuǎn)換次數(shù)）*100%,，正確轉(zhuǎn)換率越高,，說明小鼠空間識(shí)別記憶能力越強(qiáng)。

(四)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)

?高架十字迷宮（Elevated-plus maze Test,，EPM）通常由兩段開臂和兩段閉臂構(gòu)成,，距離地面51cm，底部有一塊正方形底座,，十字迷宮各臂長66cm,，寬5.0cm，閉臂臂高15cm,。小鼠由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng)，但出于好奇心和探究性又會(huì)在開臂中活動(dòng),，在面對(duì)新奇刺激時(shí),，動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生探究的沖動(dòng)與恐懼，這就造成了探究與回避的沖突行為,，從而產(chǎn)生焦慮心理,。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)是一個(gè)簡單、快速評(píng)價(jià)小鼠是否焦慮的一種方法,，因而廣泛應(yīng)用于抗焦慮藥物的研究與開發(fā),。

儀器上方裝有視頻錄像，在實(shí)驗(yàn)開始前將小鼠放入實(shí)驗(yàn)房間適應(yīng)1h,，然后把小鼠輕放在十字迷宮的開臂與閉臂交接處的中心位置,，測(cè)試開始前小鼠頭朝向開臂，釋放小鼠的同時(shí)點(diǎn)擊視頻采集,，一共錄制5min視頻,，觀察者距離迷宮中心至少１m，記錄小鼠進(jìn)入開臂和閉臂的次數(shù)和在兩臂滯留時(shí)間（進(jìn)出臂標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)嚴(yán)格界定,，以四肢全部入臂或兩只前爪出臂為準(zhǔn)）,，用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,。計(jì)算小鼠進(jìn)入開臂次數(shù)和在開臂滯留時(shí)間分別占總次數(shù)（進(jìn)入開臂和閉臂次數(shù)總和）和總時(shí)間（在開臂與閉臂滯留時(shí)間總和）的百分比，以此評(píng)價(jià)動(dòng)物是否焦慮,，通常這兩個(gè)指標(biāo)呈高度相關(guān),，抗焦慮行為表現(xiàn)為小鼠進(jìn)入開壁次數(shù)的百分比和在開壁停留時(shí)間百分比均增加，焦慮行為則相反,。

總結(jié) 

好了,，本期小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)（上）分享就到此啦，小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)（中）,、（下）篇我們會(huì)持續(xù)分享,，感興趣的小伙伴保持關(guān)注哦~歡迎大家在評(píng)論區(qū)討論，留言您想了解的話題或相關(guān)知識(shí),。靈賦拓普生物擁有整套行為學(xué)儀器設(shè)備,，詳情可咨詢致電：0755-86325431，我們竭誠為您服務(wù),。