動物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)種類繁多，分為學(xué)習(xí)記憶類,、抗焦慮抑郁類,、抗疲勞類、神經(jīng)精神類,、痛覺測試類等,，研究不同的疾病模型時(shí)，研究人員需根據(jù)關(guān)注的具體行為選擇合適的研究手段,。前兩期（詳情請點(diǎn)擊小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（中）：小鼠到底在想什么呀,？及小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（上））我們分析了動物行為學(xué)七個(gè)實(shí)驗(yàn)，以此科學(xué)客觀地評價(jià)其溝通,、社交,、學(xué)習(xí)和探索能力等。本期小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（下）讓我們繼續(xù)盤點(diǎn)小鼠行為學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn),。

(八)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

?強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（Forced swimming test）原理主要是讓小鼠被迫在一個(gè)局限且無法逃脫的空間游泳,，由于嚙齒類動物先天對水厭惡，它們在水中會拼命掙扎游動,，并試圖逃離水環(huán)境,，一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)逃離無望時(shí)動物停止掙扎表現(xiàn)出“行為絕望”狀態(tài)（漂浮不動狀態(tài)）,。小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)以游泳的不動時(shí)間為主要指標(biāo)檢測動物的絕望行為,，是抗抑郁藥物初篩以及檢測模型動物是否出現(xiàn)抑郁行為的常用檢測實(shí)驗(yàn)。強(qiáng)迫游泳的測試缸為透明圓柱形（直徑15cm,，高30cm）,，測試之前，向缸內(nèi)加入高15cm的水,，水溫保持在23-25℃,，將實(shí)驗(yàn)小鼠放入測試缸內(nèi),，視頻記錄6min，記錄后面4min小鼠不動的時(shí)間,。

(九)懸尾實(shí)驗(yàn)

?懸尾實(shí)驗(yàn)（Tail suspension test）是一種經(jīng)典而又能快速評價(jià)抗抑郁藥物,、興奮藥物、鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法,。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫,，從而放棄掙扎，進(jìn)入特有的抑郁不動狀態(tài),，實(shí)驗(yàn)過程中記錄動物不動時(shí)間來反映抑郁狀態(tài),，抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài),。將小鼠懸吊在離工作臺20-25cm的地方,，用膠帶將小鼠的尾部分后1/3固定在支架上，小鼠只有在被動地完全靜止的情況下才被認(rèn)為是不動的,，在6min的時(shí)間內(nèi),，靜止時(shí)間由一個(gè)對研究背景不了解的實(shí)驗(yàn)人員記錄。

(十)水迷宮實(shí)驗(yàn)

?水迷宮實(shí)驗(yàn)（Morris water maze）是一種利用動物厭水天性,，迫使動物尋找水中隱藏可站立平臺的實(shí)驗(yàn),。并通過對小鼠尋找平臺所花費(fèi)的時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，判斷動物對于空間位置和方向的記憶能力,。在圓形水池（直徑120cm ）中放置一個(gè)逃生平臺（直徑10cm ）,。水池注入水并用染料將水進(jìn)行染色，水溫保持在 23±1℃,，水迷宮東西南北方向自定義,，一般定義為S在實(shí)驗(yàn)者方向，N在實(shí)驗(yàn)者相反的方向,，E在右邊,，W在左邊，這樣迷宮就分為4個(gè)象限,，平臺位于其中一個(gè)象限的中間,。實(shí)驗(yàn)的平臺可放在一個(gè)象限中進(jìn)行所有的實(shí)驗(yàn)，或者平臺在每一個(gè)象限中測試1/4的動物,，后一種方法抵消了可能的象限效應(yīng),。一名實(shí)驗(yàn)人員可以使用8種不同的平臺位置。無論選擇哪個(gè)象限,，平臺通常位于中心和墻壁的中間位置,，盡管有時(shí)也會使用其他安排。為了防止形成起始位置與目標(biāo)平臺的產(chǎn)生長短距離,，一般起始位置的選擇不應(yīng)選擇平臺所在的象限起始位置,，例如目標(biāo)是SE,，起始位置可選N、W,、NE,、SW。

獲得性訓(xùn)練：將小鼠頭朝池壁放入水中,，放入位置隨機(jī)取東（E）,、西（W）、南（S）,、北（N）四個(gè)起始位置之一,。記錄動物找到水下平臺的時(shí)間。在前幾次訓(xùn)練中,，如果這個(gè)時(shí)間超過60s，則引導(dǎo)動物到平臺或直接將動物放在平臺上,，讓動物在平臺上停留15s,。每只動物每天訓(xùn)練4次，實(shí)驗(yàn)之間的間隔10-15s到5-15min都可以,，訓(xùn)練5天（如table 1,，獲得性訓(xùn)練的平臺在SW，逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練的平臺在NE）,，連續(xù)訓(xùn)練至小鼠找到平臺的時(shí)間低于15s,。

探查訓(xùn)練：最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天，將平臺撤除,，開始60s的探查訓(xùn)練,。將動物由原先平臺象限的對側(cè)放入水中。記錄動物在目標(biāo)象限（原先放置平臺的象限）所花的時(shí)間和進(jìn)入該象限的次數(shù),，以此作為空間記憶的檢測指標(biāo),。

逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練：測定動物的工作記憶（working memory）。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,，開始逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練,。將平臺放在原先平臺所在象限的相反象限，方法與獲得性訓(xùn)練相同,。每天訓(xùn)練4次,。每次記錄找到平臺的時(shí)間和游泳距離以及游泳速度。

逆轉(zhuǎn)探查訓(xùn)練：最后一次逆轉(zhuǎn)訓(xùn)練的第二天進(jìn)行,，方法與上述探查訓(xùn)練類似,；記錄動物60s內(nèi)動物在目標(biāo)象限（平臺第二次所在區(qū)）所花時(shí)間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。學(xué)習(xí)和記憶能力評估：記錄測試小鼠在每個(gè)象限中花費(fèi)的時(shí)間百分比,、在訓(xùn)練過的平臺位置上經(jīng)過的次數(shù),、在未訓(xùn)練的象限中的相應(yīng)區(qū)域中花費(fèi)的時(shí)間和游泳速度,。通過記錄測試小鼠在每個(gè)象限中花費(fèi)的時(shí)間、在訓(xùn)練的平臺位置上的經(jīng)過次數(shù)和在未訓(xùn)練的象限中的類似位置所花費(fèi)的時(shí)間進(jìn)行比較來評估探索試驗(yàn)中測試小鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力,。

(十一）前脈沖抑制實(shí)驗(yàn)

?前脈沖抑制實(shí)驗(yàn)（Prepulse Inhibition,，PPI）是一種感覺運(yùn)動門控的測量方法，中樞神經(jīng)系統(tǒng)天然具有過濾和篩選信息的能力,，以保證思維的連貫性,，這個(gè)機(jī)制稱為感覺運(yùn)動門控。精神分裂癥具有感覺運(yùn)動門控失調(diào)或前脈沖抑制缺失的現(xiàn)象,，PPI被認(rèn)為是建立精神分裂癥動物模型一個(gè)重要的基礎(chǔ),。PPI是指在一個(gè)較強(qiáng)的驚跳刺激之前約30-500毫秒（ms）預(yù)先給予一個(gè)較弱的刺激可以抑制對驚跳刺激的反應(yīng)程度。本研究中PPI的檢測使用SR-LAB驚跳反射檢測系統(tǒng)（San Diego Instruments,，San Diego, CA）,。PPI實(shí)驗(yàn)共42個(gè)測試（trials）：包括6個(gè)驚跳測試（Pulse-alone，120dB）,，前脈沖刺激和驚跳強(qiáng)刺激聯(lián)合測試（Prepulse+Pulse,，74-120dB，78-120dB,， 82-120dB,，86-120dB， 90-120dB）各6個(gè),，6個(gè)無刺激測試（70dB）,。在實(shí)驗(yàn)之前，將每只小鼠在背景白噪聲（背景噪聲70 dB,，此強(qiáng)度下的噪聲可以較好地掩蓋實(shí)驗(yàn)室環(huán)境噪聲）下適應(yīng)有機(jī)玻璃圓柱體5min,。隨后是42個(gè)測試以隨機(jī)順序出現(xiàn)，平均間隔為15s,。測試共有7種類型：測試1（120dB）,，持續(xù)40ms；測試2-6（5種前脈沖強(qiáng)度分別為74dB,，78dB,， 82dB，86dB,,，90dB,，前脈沖持續(xù)20ms，然后是100ms的間隔,，再出現(xiàn)120dB驚跳強(qiáng)刺激,，持續(xù)時(shí)間40ms）；測試7，70 dB背景噪聲,；7類測試均出現(xiàn)6次,。記錄驚嚇反應(yīng)65ms，從驚嚇刺激開始每隔1ms測量一次,。在65ms采樣窗口內(nèi)記錄的最大驚嚇幅度（mV_Max）作因變量,。由每個(gè)前預(yù)脈沖強(qiáng)度引起的PPI的百分比（PPI%）計(jì)算為[1-（平均Prepulse+Pulse的反應(yīng)幅度）/（平均Pulse-alone的反應(yīng)幅度）]×100％。

總結(jié) 

靈賦拓普生物擁有大小鼠行為學(xué)平臺,，提供充分的動物實(shí)驗(yàn)空間,，專業(yè)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)備及記錄分析系統(tǒng)，可提供水迷宮,、新物體識別,、Y迷宮、轉(zhuǎn)棒,、曠場,、強(qiáng)迫游泳、高架十字迷宮等全套測試設(shè)備,。平臺有專業(yè)博士指導(dǎo),，歡迎廣大客戶致電咨詢：0755-86325431，我們竭誠為您服務(wù),。