一、實(shí)驗(yàn)材料：

(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：巴馬小型豬，18-22kg,，雄性,，6只；

(2)實(shí)驗(yàn)材料:鏈脲佐菌素( streptozotocin,，STZ),，血糖儀及試紙，胰島素試劑盒,，舒泰50,；

(3)客戶需求：靈賦拓普提供飼養(yǎng)場(chǎng)地及采購(gòu)動(dòng)物，完成巴馬豬1型糖尿病模型建立,，安樂(lè)死及大體解剖尸體處理,。

二、實(shí)驗(yàn)方法：

糖尿病模型建立

(1)造模方式

6只巴馬小型豬采購(gòu)接收后,，進(jìn)行檢疫飼養(yǎng),，實(shí)驗(yàn)日期確定后，提前24小時(shí)禁食,，造模當(dāng)天隨機(jī)抽取3只小型豬進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉,，建立耳靜脈通道，將STZ配制成50ml溶液按照150mg/KG體重劑量4min靜脈注射進(jìn)入巴馬小型豬體內(nèi),。

在應(yīng)用 STZ 后 6 h 喂飼高糖飼料,，1 kg飼料添加 400 ～ 500 g 蔗糖，避免一過(guò)性低血糖引起并發(fā)癥,。

另外3只小型豬做為對(duì)照組,，注射等量生理鹽水，正常檢測(cè)血糖及開(kāi)展后續(xù)體重及糖耐實(shí)驗(yàn),。

(2)空腹血糖檢測(cè)

STZ給藥后,，分別于0h，2h,，4h,，6h，8h,，10h,，12h，14h,，16h,，18h，20h,，22h,，24h檢測(cè)血糖含量,。

STZ給藥后，分別進(jìn)行每周兩次血糖測(cè)試,，每次間隔3-4天（初步定在周二,，周五），連續(xù)檢測(cè)3周,。測(cè)血糖前要空腹,。

為確保動(dòng)物存活，在血糖高于20 mmol /L時(shí)皮下注射胰島素 12U,，高于 25 mmol /L時(shí)注射 20 U,。

(3)口服糖耐測(cè)試

STZ給藥后3周，進(jìn)行糖耐量測(cè)試,，空腹口服溶于80-100ml水內(nèi)的無(wú)水葡萄糖粉25g,，5分鐘內(nèi)喝完，從口服第一口開(kāi)始計(jì)算,，于口服前0h,，口服后0.5h，1h,，2h采血測(cè)試血糖含量,。測(cè)試過(guò)程中，盡量避免動(dòng)物過(guò)激掙扎,。

(4)體重檢測(cè)

STZ給藥后,，分別進(jìn)行每周兩次體重稱量，每次間隔3-4天（初步定在周二,，周五）,，連續(xù)檢測(cè)3周。（先稱重在測(cè)每周血糖）

糖尿病模型驗(yàn)證

當(dāng)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組給藥后血糖和糖耐量實(shí)驗(yàn)有顯著性差異,，血糖穩(wěn)定在17mmol/L以上,，且體重明顯下降，則提示模型成功,。

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