科研汪們廢寢忘食,、不分晝夜地做實(shí)驗(yàn)搞科研,,數(shù)據(jù)、文章都完美無瑕,。到最后投稿這一哆嗦,,期刊要求必須出具細(xì)胞株STR鑒定報(bào)告,實(shí)驗(yàn)汪們那時(shí)才意識到科研竟有如此操作??!
急急忙忙做鑒定,結(jié)果竟是其他細(xì)胞(大部分是萬惡的Hela細(xì)胞),,此時(shí)才萬念俱灰?。?!
什么是細(xì)胞株STR鑒定,?
STR(Short Tandem Repeat)即短串聯(lián)重復(fù)序列,其基因位點(diǎn)是由長度為3~7個(gè)堿基對的短串連重復(fù)序列組成,,這些短串聯(lián)重復(fù)序列廣泛存在于人類基因組中,,可作為高度多態(tài)性標(biāo)記,被稱為細(xì)胞的DNA指紋,。
為什么要做STR鑒定,?
據(jù)統(tǒng)計(jì)約30%細(xì)胞系被交叉污染或錯(cuò)誤辨識,因使用了交叉污染或錯(cuò)誤辨識的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯(cuò)誤,、結(jié)果不可重復(fù),、臨床細(xì)胞治療災(zāi)難性后果……,這浪費(fèi)大量時(shí)間,、精力和金錢,。因此,科研汪們最好在開展課題前提早做細(xì)胞株鑒定,,確定細(xì)胞是否存在問題,;而階段性的鑒定也是必須的,因?yàn)榧?xì)胞經(jīng)過反復(fù)傳代后(5代以上),,突變和交叉污染的幾率極大
科研福利來了~~,,深圳拓普生物提供人源細(xì)胞系STR鑒定服務(wù),您只需要提供些許樣品,,我們幫您一辨細(xì)胞真假,為您的科研工作提供安全保障,!
細(xì)胞株STR鑒定流程
(1) 首先是提取細(xì)胞的基因組DNA,,提取后需進(jìn)行質(zhì)量鑒定,,即OD260/OD280=1.8-2.0。
(2) 熒光引物PCR擴(kuò)增STR位點(diǎn),。
(3) 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過毛細(xì)管電泳,,獲得細(xì)胞基因的分型結(jié)果
(4) STR的數(shù)據(jù)庫比對,比對數(shù)據(jù)庫為美國的ATCC細(xì)胞庫,,德國的DSMZ細(xì)胞庫,,日本的JCRB細(xì)胞庫。
STR鑒定案例——THP-1細(xì)胞STR鑒定分析
1,、細(xì)胞THP-1的STR分型圖譜
2,、STR 位點(diǎn)分型結(jié)果
檢測樣本位點(diǎn)數(shù)據(jù)與ATCC標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)的匹配率為100%。