1. 包埋的種類
用于組織包埋的材料有石蠟,、碳蠟,、樹脂、火棉膠和各種塑料等,。石蠟是最常用的組織包埋劑,。甲基丙烯酸甲酯的硬度很強,多用于未脫鈣骨組織的包埋,。環(huán)氧樹脂和甲基丙烯酸甲酯同樣需要更復雜的包埋處理過程,。Epon主要用于電鏡組織的包埋。碳蠟包埋的主要優(yōu)點是不經(jīng)過脫水與透明處理,,故組織塊收縮較少,,所以特別適用于脂肪及類脂的制片?;鹈弈z主要用于大塊組織和眼球的包埋,對研究神經(jīng)組織和眼球等有一定的幫助,。塑料包埋需要特殊試劑脫水和透明,,全過程必須手工操作。塑料包埋多用于骨髓穿刺,,腎穿刺和肝穿刺等小塊組織的包埋,。石蠟包埋是一種常規(guī)包埋法,,其獨特優(yōu)點是能切出極薄的蠟片 (2~10μm),所制作的切片能連成蠟帶,,便于制作連續(xù)切片,,而且操作較容易,組織塊可以包埋在石蠟中長期保存,。
2. 包埋步驟
(1)包埋時的用蠟需預先熔化,,充分沉淀后使用。
(2)將熔蠟注入蠟模內(nèi),,將鑷子加溫,,夾持浸好蠟的組織塊,選擇好包埋面,,將其朝下埋入熔蠟內(nèi),,用鑷子輕輕按壓,使組織在蠟中并緊貼蠟模底部,。
(3)待熔蠟表面凝固后,,可投入流水中、放進冰箱冷凍室或包埋機冷臺上促凝,。
(4)待蠟完全凝固后脫模,,并把蠟塊四周適當修切。組織周圍應留有1~2mm的蠟邊,。
3. 包埋面的選擇
(1)一般情況下以組織最大面為包埋面,。
(2)管狀結(jié)構(gòu)的組織以橫切面為包埋面。
(3)皮膚組織或有表層上皮的組織,,包埋面應垂直于上皮表面,。
(4)帶有病變特點的組織,或者對包埋面有特別要求的組織應按預先標記的包埋,。
4. 包埋的注意事項:
1.包埋時組織要盡量平整 ,,尤其是穿刺組織,要輕輕壓平;遇較碎的組織,,要盡量包在包埋模具的中央,,并且要平整。
2.皮膚,、血管,、粘膜等組織要按由內(nèi)到外的方向垂直立埋,多條組織方向要一致,,管狀標本要以橫斷面平貼于模具垂直立埋
3.包埋模具中的石蠟不要灌注過滿,,以塑料盒的1/3
4.包埋用石蠟必須定期過濾,蠟溫應控制在62℃左右,。
5.包埋時應嚴格分塊包埋,,并同時包入相應的小號,,切勿包錯。不得將來歷不明的碎組織塊任意包入,,以防污染,。
6.組織包埋完成后必須進行清點蠟塊數(shù)量,以防組織塊在脫水,、包埋過程中遺失,。