WHO,、GIobcan 2020統(tǒng)計(jì)報(bào)道2020年肺癌新發(fā)病例2206771例，占比約11.4%,，是2020年癌癥病發(fā)率的第二位,，而肺癌死亡病例為1796144例，占比約18%,，病死率排第一位,。盡管手術(shù)、放療,、化療和靶向治療取得了很大進(jìn)展,，但由于在診斷時(shí)大多數(shù)患者已局部晚期或出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，預(yù)后仍然較差,，5年生存率僅為15%,！。醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究的重要組成部分,，更是臨床實(shí)驗(yàn)及治療的理論依據(jù)和基礎(chǔ),。

本期我們將分享小鼠肺原位注射相關(guān)知識(shí)：
一、肺部解剖

肺原位注射用于肺局部給藥和腫瘤細(xì)胞種植,。
小鼠左肺僅有1葉,，右肺有4葉，分為右前葉,、右中葉,、右后葉和較小的腔后葉,。因此，進(jìn)行局部給藥和腫瘤細(xì)胞種植時(shí)通常選擇左肺,。
小鼠左肺側(cè)位體表位置：冠狀面在左肩關(guān)節(jié)水平線以下,，橫截面以左上臂后緣為中心。

二,、注射所需器械與耗材

器械與耗材：
（1）29G胰島素注射器
（2）標(biāo)尺
（3）眼科剪
（4）眼科鑷
（5）細(xì)胞染色液
三,、操作方法

（1）距離針尖5mm處，將針頭彎曲約90°,；

（2）將小鼠麻醉,，然后右側(cè)臥固定，備皮消毒,；

（3）于腋中線上,、肋緣和肩鎖關(guān)節(jié)中間部位，將皮膚作1cm開口,；

（4）鈍性分離皮下組織,，明顯可見左肺輪廓；

（5）注射器中吸入20-50ul細(xì)胞混懸液,；

（6）將胰島素注射器針頭完全垂直通過肋間刺入肺中,；

（7）注射細(xì)胞，靜止數(shù)秒后拔針,；

（8）閉合創(chuàng)口,，消毒，待小鼠蘇醒,。

四,、結(jié)果展示

分別注射25ul和50ul染色液，注射后解剖可見肺部明顯液體蓄積,。

五,、注意事項(xiàng)

（1）注意針頭不刻意下壓，以免貫通左肺肺葉,；

（2）由圖可見,，注射量不宜超過50ul，為了保證注射物可以局限在左肺葉內(nèi),，應(yīng)適當(dāng)降低注射量,；

（3）小鼠周齡也是影響注射量的原因之一。
六,、常見模型案例

小鼠原位肺癌模型構(gòu)建：選擇C57BL/6小鼠,，６~８周，雌性，體重約22ｇ,。LLC細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)及配制２×107個(gè)/ML，LLC細(xì)胞無血清懸液0.2ML,，在 SPF 級(jí)手術(shù)間操作,，腹腔注射濃度為４％的水合氯醛溶液麻醉（麻醉用量為小鼠體重的１％），小鼠右側(cè)臥位,，定位于小鼠左側(cè)腋下以碘伏消毒并備皮,，再次消毒后行1cm切口，鈍性分 離 至 肋 骨 表 面,，可 見 明 顯 呼 吸 及 肺 臟 活動(dòng),，在肋骨上緣１ml注射器垂直穿刺約3mm，緩慢注射細(xì)胞懸液約50μｌ并停留３～５ｓ迅速拔針,，觀察數(shù)秒是否氣胸形成,，呼吸如常，碘伏再次消毒以細(xì)絲線單純間斷縫合２針,。

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