WHO,、GIobcan 2020統(tǒng)計報道2020年肺癌新發(fā)病例2206771例,，占比約11.4%，是2020年癌癥病發(fā)率的第二位,，而肺癌死亡病例為1796144例,，占比約18%，病死率排第一位,。盡管手術(shù),、放療、化療和靶向治療取得了很大進展,，但由于在診斷時大多數(shù)患者已局部晚期或出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,，預(yù)后仍然較差，5年生存率僅為15%,！,。醫(yī)學(xué)動物實驗是基礎(chǔ)實驗研究的重要組成部分，更是臨床實驗及治療的理論依據(jù)和基礎(chǔ),。

本期我們將分享小鼠肺原位注射相關(guān)知識：
一,、肺部解剖

肺原位注射用于肺局部給藥和腫瘤細胞種植。
小鼠左肺僅有1葉,，右肺有4葉,，分為右前葉、右中葉,、右后葉和較小的腔后葉,。因此,，進行局部給藥和腫瘤細胞種植時通常選擇左肺。
小鼠左肺側(cè)位體表位置：冠狀面在左肩關(guān)節(jié)水平線以下,，橫截面以左上臂后緣為中心,。

二、注射所需器械與耗材

器械與耗材：
（1）29G胰島素注射器
（2）標尺
（3）眼科剪
（4）眼科鑷
（5）細胞染色液
三,、操作方法

（1）距離針尖5mm處,，將針頭彎曲約90°；

（2）將小鼠麻醉,，然后右側(cè)臥固定,，備皮消毒；

（3）于腋中線上,、肋緣和肩鎖關(guān)節(jié)中間部位,，將皮膚作1cm開口；

（4）鈍性分離皮下組織,，明顯可見左肺輪廓,；

（5）注射器中吸入20-50ul細胞混懸液；

（6）將胰島素注射器針頭完全垂直通過肋間刺入肺中,；

（7）注射細胞,，靜止數(shù)秒后拔針；

（8）閉合創(chuàng)口,，消毒,，待小鼠蘇醒。

四,、結(jié)果展示

分別注射25ul和50ul染色液,，注射后解剖可見肺部明顯液體蓄積。

五,、注意事項

（1）注意針頭不刻意下壓,，以免貫通左肺肺葉；

（2）由圖可見,，注射量不宜超過50ul,，為了保證注射物可以局限在左肺葉內(nèi)，應(yīng)適當降低注射量,；

（3）小鼠周齡也是影響注射量的原因之一,。
六、常見模型案例

小鼠原位肺癌模型構(gòu)建：選擇C57BL/6小鼠,，６~８周,，雌性，體重約22ｇ,。LLC細胞計數(shù)板計數(shù)及配制２×107個/ML,，LLC細胞無血清懸液0.2ML,，在 SPF 級手術(shù)間操作，腹腔注射濃度為４％的水合氯醛溶液麻醉（麻醉用量為小鼠體重的１％）,，小鼠右側(cè)臥位,，定位于小鼠左側(cè)腋下以碘伏消毒并備皮，再次消毒后行1cm切口,，鈍性分 離 至 肋 骨 表 面,，可 見 明 顯 呼 吸 及 肺 臟 活動，在肋骨上緣１ml注射器垂直穿刺約3mm,，緩慢注射細胞懸液約50μｌ并停留３～５ｓ迅速拔針,，觀察數(shù)秒是否氣胸形成，呼吸如常,，碘伏再次消毒以細絲線單純間斷縫合２針,。

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