• 支原體簡介

1. 何為支原體：支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡單的原核生物,，直徑50-300nm,，基因數(shù)量為480,，wei一可見的細胞器只有核糖體,。于1898年Nocard等發(fā)現(xiàn)并命名,，不僅能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖，能通過細菌濾器,。

2. 支原體分布：支原體存在于我們身體很多地方,，如眼睛，鼻孔,，肛門,，口腔，陰道等都存在支原體,。

• 支原體對細胞的影響

粘附于宿主細胞表面的支原體從細胞吸收營養(yǎng),，從細胞膜獲得膽固醇等脂質，引起細胞損傷,。在細胞培養(yǎng)中大多細胞表現(xiàn)為分泌物增多,、細胞破碎、生長緩慢,，嚴重者導致細胞死亡,。
此外，支原體代謝產(chǎn)生的有毒物質,，如溶神經(jīng)支原體能產(chǎn)生神經(jīng)毒素,，引起細胞膜損傷,；有的支原體含有尿素酶，可以水解尿素產(chǎn)生大量氨,，對細胞有毒害作用,。
當培養(yǎng)中的細胞生長緩慢，漂浮物增多時就有必要做支原體檢測,。對于珍貴的細胞可以做到早發(fā)現(xiàn),，早搶救！

三,、支原體檢測步驟
1、試劑與耗材：包括引物,、DNA聚合酶、去離子水,、移液器頭,、PCR管等。
2,、模板：細胞培養(yǎng)48 h后的培養(yǎng)基經(jīng)沸水浴10min,，取上清即可
3、PCR擴增：將反應體系配好混勻,，選擇合適的程序進行擴增,。
4、瓊脂糖糖凝膠電泳（如下圖）
陰性,，無DNA條帶出現(xiàn),；
陽性，引物1有大小約187 bp的DNA條帶出現(xiàn),；引物2有大小約205bp的DNA條帶出現(xiàn),。

靈賦拓普支原體檢測優(yōu)勢：
（1）精準：采用經(jīng)典的PCR法，能夠檢測極微量的樣品,，并且條帶單一,，清晰無雜帶；
（2）檢測范圍廣：我們采用2對引物分別來檢測,，可檢測二百多種支原體,，涵蓋細胞培養(yǎng)遇見的所有常見種類；
（3）高效：收到樣品2天內(nèi)即可出具實驗報告,。