• 支原體簡介

1. 何為支原體：支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡單的原核生物,，直徑50-300nm,，基因數(shù)量為480，wei一可見的細(xì)胞器只有核糖體,。于1898年Nocard等發(fā)現(xiàn)并命名,，不僅能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖，能通過細(xì)菌濾器,。

2. 支原體分布：支原體存在于我們身體很多地方,，如眼睛，鼻孔,，肛門,，口腔，陰道等都存在支原體,。

• 支原體對細(xì)胞的影響

粘附于宿主細(xì)胞表面的支原體從細(xì)胞吸收營養(yǎng),，從細(xì)胞膜獲得膽固醇等脂質(zhì)，引起細(xì)胞損傷。在細(xì)胞培養(yǎng)中大多細(xì)胞表現(xiàn)為分泌物增多,、細(xì)胞破碎,、生長緩慢，嚴(yán)重者導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。
此外,，支原體代謝產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，如溶神經(jīng)支原體能產(chǎn)生神經(jīng)毒素,，引起細(xì)胞膜損傷,；有的支原體含有尿素酶，可以水解尿素產(chǎn)生大量氨,，對細(xì)胞有毒害作用,。
當(dāng)培養(yǎng)中的細(xì)胞生長緩慢，漂浮物增多時就有必要做支原體檢測,。對于珍貴的細(xì)胞可以做到早發(fā)現(xiàn),，早搶救！

三,、支原體檢測步驟
1、試劑與耗材：包括引物,、DNA聚合酶,、去離子水、移液器頭,、PCR管等,。
2、模板：細(xì)胞培養(yǎng)48 h后的培養(yǎng)基經(jīng)沸水浴10min,，取上清即可
3,、PCR擴增：將反應(yīng)體系配好混勻，選擇合適的程序進(jìn)行擴增,。
4,、瓊脂糖糖凝膠電泳（如下圖）
陰性，無DNA條帶出現(xiàn),；
陽性,，引物1有大小約187 bp的DNA條帶出現(xiàn)；引物2有大小約205bp的DNA條帶出現(xiàn),。

靈賦拓普支原體檢測優(yōu)勢：
（1）精準(zhǔn)：采用經(jīng)典的PCR法,，能夠檢測極微量的樣品，并且條帶單一,，清晰無雜帶,；
（2）檢測范圍廣：我們采用2對引物分別來檢測，可檢測二百多種支原體，涵蓋細(xì)胞培養(yǎng)遇見的所有常見種類,；
（3）高效：收到樣品2天內(nèi)即可出具實驗報告,。