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骨質(zhì)疏松模型造模方法、觀察指標(biāo),、Elisa,、生化、影像,、病理檢測,這篇全了,!

發(fā)布時間:2024-04-19
骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,,OP)是繼高血壓、冠心病,、糖尿病后,,引起學(xué)者們關(guān)注的中老年高發(fā)病之一,以骨質(zhì)改變?yōu)橹?,以股骨改變最為明顯,。女性絕經(jīng)后引起的OP是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的一種,絕經(jīng)后雌激素水平逐漸降低,而雄激素缺乏是男性骨質(zhì)疏松的重要危險因素,。

骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,,OP)是繼高血壓、冠心病,、糖尿病后,,引起學(xué)者們關(guān)注的中老年高發(fā)病之一,以骨質(zhì)改變?yōu)橹?,以股骨改變最為明顯,。女性絕經(jīng)后引起的OP是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的一種,絕經(jīng)后雌激素水平逐漸降低,,而雄激素缺乏是男性骨質(zhì)疏松的重要危險因素,。

實驗動物信息
動物模型名稱骨質(zhì)疏松大鼠模型
動物的種屬、品系SD 大鼠
動物性別♀/
動物年齡3-6月齡


有研究表明,,性激素能促進(jìn)破骨細(xì)胞凋亡,,而體內(nèi)性激素水平下降導(dǎo)致破骨細(xì)胞凋亡的減少和骨吸收的增加,表現(xiàn)為高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)代謝改變,,引起破骨,、成骨趨于重新構(gòu)建動態(tài)平衡[1],終而引起影像學(xué)上可見的骨密度(Bonemineraldensity,,BMD)減少以及骨松質(zhì)增多的骨組織微結(jié)構(gòu)改變,。

常用的造模方法為:雙側(cè)卵巢/睪丸摘除術(shù),術(shù)后給予青霉素鈉20萬單位肌肉注射3天以防感染,。



觀察指標(biāo)
以骨密度(BMD)降低,、骨小梁孔隙增大、骨密質(zhì)減少為特征,,骨質(zhì)量明顯下降,,骨脆性增加而易于骨折[2]病理骨組織切片在顯微鏡下觀察,,可見骨小梁斷裂,,排列稀疏,形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性差,。型前膠原氨基端原肽(Procollagen I N-Terminal Propeptide,,PINP)、堿性磷酸酶(ALP),、骨特異性堿性磷酸酶(BALP)表達(dá)水平顯著下降,;型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-I)及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 等因子表達(dá)量上調(diào)。

注:骨密度指標(biāo)分析

相關(guān)的影像學(xué)檢測
通過微計算機斷層掃描(micro-computed tomography, micro-CT)檢測大鼠骨組織,,可計算骨密度,、觀察骨小梁微結(jié)構(gòu)并生成3D圖像,,分析骨體積分?jǐn)?shù)(骨體積/組織體積, bone volume/tissue volume, BV/TV)、骨小梁數(shù)目(trabecular number , Tb.N),、骨小梁間距(trabecular separation , Tb.Sp),、骨小梁厚度(trabecular thickness , Tb.Th)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(structure model index , SMI),。

注:假手術(shù)鼠與模型鼠骨小梁micro-CT掃描比較[2]

相關(guān)的ELISA檢測
破骨細(xì)胞分化和活化的必要細(xì)胞因子:巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB配體受體激活劑(RANKL[3]
新骨形成的特異性的敏感指標(biāo):檢測型前膠原羧基端原肽(PICP)或型前膠原氨基端原肽(PINP)在血清中的含量,,可反映成骨細(xì)胞合成骨膠原的能力[4],。
相關(guān)的生化檢測
骨鈣素(OC)是研究骨代謝的一項特異性生化指標(biāo),其參與成骨細(xì)胞分化,,可反映骨形成[4],。
相關(guān)的病理檢測
堿性磷酸酶(ALP)是成熟成骨細(xì)胞的標(biāo)志性細(xì)胞外酶,反映成骨細(xì)胞活力,。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色可顯示破骨細(xì)胞的數(shù)量及分布情況,。
此外,免疫組化檢測可對某些蛋白進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,,如:
人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2在骨代謝中具有促進(jìn)成骨細(xì)胞分化成熟的作用
Cathepsin K參與骨重塑和吸收,,主要在破骨細(xì)胞中表達(dá),。

注:假手術(shù)鼠與模型鼠骨小梁HE染色結(jié)果比較[5]
注:假手術(shù)鼠與模型鼠骨組織Bmp-2染色結(jié)果比較[6]



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參考文獻(xiàn)

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【3】Takahashi N, Udagawa N, Suda T. A new member of tumor necrosis factor ligand family, ODF/OPGL/TRANCE/RANKL, regulates osteoclast differentiation and function. Biochem Biophys Res Commun. 1999 Mar 24;256(3):449-55.
【4】張萌萌,徐又佳,侯建明等.骨質(zhì)疏松實驗室診斷及影響因素專家共識[J].2022,2809:1249-1259.
5Chen G, Long C, Wang S, Wang Z, Chen X, Tang W, He X, Bao Z, Tan B, Zhao J, Xie Y, Li Z, Yang D, Xiao G, Peng S. Circular RNA circStag1 promotes bone regeneration by interacting with HuR. Bone Res. 2022 Mar 31;10(1):32.
6Hao J, Bei J, Li Z, Han M, Ma B, Ma P, Zhou X. Qing`e Pill Inhibits Osteoblast Ferroptosis via ATM Serine/Threonine Kinase (ATM) and the PI3K/AKT Pathway in Primary Osteoporosis. Front Pharmacol. 2022 Jul 5;13:902102.