細(xì)胞質(zhì)量決定實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程與結(jié)果,,相信很多小伙伴在細(xì)胞培養(yǎng)上走了不少?gòu)澛?,因?yàn)榧?xì)胞一旦污染,,大多數(shù)較難處理(只有扔),。由于細(xì)胞污染而耽誤了實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,,影響畢業(yè)和發(fā)文章進(jìn)程的事件時(shí)常發(fā)生,。
所以今天靈賦拓普整理了一下細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法,,了解到底哪里出了問題?下次應(yīng)該怎么避免,。學(xué)會(huì)對(duì)各種污染情況的辨別和處理是一項(xiàng)不可或缺的實(shí)驗(yàn)技能,,希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實(shí)驗(yàn)操作,學(xué)會(huì)如何應(yīng)對(duì)細(xì)胞污染,。
1.1、細(xì)菌污染
細(xì)菌污染最為常見,,一旦操作稍有不當(dāng),,就會(huì)引起細(xì)胞污染,細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)球形,、桿狀等,,其次,培養(yǎng)液發(fā)黃,,變渾濁,,還有異樣氣味發(fā)出,如下圖所示:
處理方法:在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,,但是對(duì)細(xì)胞本身也有影響,,狀態(tài)會(huì)變差,所以,,防范于未然,,嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作規(guī)范,需要定期清理消毒培養(yǎng)設(shè)施,。
1.2,、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,不會(huì)像細(xì)菌感染大爆發(fā),,所以很難早期發(fā)現(xiàn),,鏡下有時(shí)候呈現(xiàn)絲狀、珊瑚狀,。
處理方法:趕緊扔掉,,不要再想挽救。然后消毒滅菌細(xì)胞房,,細(xì)胞培養(yǎng)箱,,器皿等。
1.3,、霉菌污染
培養(yǎng)液是清亮的,,慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,如同風(fēng)中柳絮,,一般不仔細(xì)看發(fā)覺不出來(lái),。細(xì)胞仍可生長(zhǎng),但時(shí)間一長(zhǎng),,細(xì)胞的狀態(tài)就變差,,不再增長(zhǎng)。
處理方法:建議果斷舍棄該污染細(xì)胞,,將環(huán)境徹底消毒,,采用75%酒精擦洗一遍細(xì)胞培養(yǎng)箱,再用新潔爾滅擦洗一遍,,把水盤里加上飽和量的硫酸銅,。
1.4、支原體感染
支原體感染細(xì)胞以后,,細(xì)胞病變不很明顯,,只是細(xì)胞狀態(tài)變差、生長(zhǎng)變慢,,在顯微鏡下觀察可能會(huì)有小黑點(diǎn),,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點(diǎn),,細(xì)胞空泡化,,很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞,,最終細(xì)胞漂浮,,完全死亡。
處理方法:使用支原體清除培養(yǎng)基,。
1.5,、黑膠蟲污染
顯微鏡下可見點(diǎn)狀或片狀游動(dòng)小體,培養(yǎng)液也是不渾的,,一般不會(huì)太影響,,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多,,且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化,,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失。
處理方法:使用黑膠蟲去除劑,,盡早處理細(xì)胞,,越快越好,。
2.1 污染原因一:培養(yǎng)箱太久沒清潔
細(xì)胞污染了,不應(yīng)該直接扔了培養(yǎng)皿就完事了,;你還得看看這個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿是否污染,,需要培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,,照紫外,;半個(gè)月?lián)Q一次細(xì)胞培養(yǎng)箱里的水,每次用酒精擦洗托盤,。
(深圳靈賦拓普生物科技有限公司---細(xì)胞房設(shè)備)
2.2 污染原因二:超凈臺(tái)和桌面,,清理不到位
(深圳靈賦拓普生物---細(xì)胞房設(shè)備)
超凈臺(tái)里不能堆放大量的培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子,、槍頭等,,防止紫外線照不到衛(wèi)生死角,還會(huì)影響超凈工作臺(tái)里的氣流穩(wěn)定,。細(xì)胞房里的桌面,切忌東西堆積如山,。
2.3 污染原因三:細(xì)胞房人多,,著裝不規(guī)范
(深圳靈賦拓普生物---細(xì)胞房著裝要求)
細(xì)胞房衛(wèi)生要求很高,人多了,,不確定因素多了,。另外,要按要求合理著裝,。超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),,做試驗(yàn)時(shí)喜歡說(shuō)話,殊不知你說(shuō)話時(shí)的氣體里面就有很多細(xì)菌呢,,盡量不閑聊,。
3:結(jié)語(yǔ)
細(xì)胞污染不易察覺,卻是關(guān)乎我們實(shí)驗(yàn)成敗的大事,,越是需要我們?nèi)粘5恼J(rèn)真對(duì)待,,相信以上對(duì)于細(xì)胞房常見污染物的鑒別和解決方案的制定,能幫助我們科研工作者解決細(xì)胞最重要的問題,,如果您還是未找到問題所在,,歡迎您留言,我們期待著為您解答,。