(一)種鼠選擇:把好遺傳與健康雙關(guān) 遺傳背景:優(yōu)先挑選近交系(如 C57BL/6)或基因編輯明確的小鼠,,最大程度降低遺傳漂變風(fēng)險(xiǎn),,保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。 健康篩查:SPF級(jí)種鼠必須通過(guò)MHV,、MNV 等 12 項(xiàng)病原體檢測(cè),,從源頭上杜絕垂直傳播隱患,為健康種群奠定基礎(chǔ),。 (二)繁殖策略:優(yōu)化配比與周期 配種比例:遵循 1 雄鼠配 2-3 雌鼠的原則,,防止過(guò)度交配造成精子質(zhì)量下滑,維持良好的繁殖能力,。 繁殖周期:雌鼠最佳繁殖期為 8-20 周齡,,且每胎間隔不少于 3 周,避免母體因連續(xù)繁殖過(guò)度損耗,,保證母鼠和幼鼠的健康,。 (一)環(huán)境控制:打造穩(wěn)定舒適空間 溫濕度:將溫度控制在20-26℃,,濕度保持在40-70%,,每日密切監(jiān)測(cè),,確保溫濕度波動(dòng)不超過(guò) ±2℃,,為小鼠提供穩(wěn)定的生存環(huán)境。 光照周期:采用 12 小時(shí)明 / 12 小時(shí)暗的光照周期,,同時(shí)避免強(qiáng)光直射,,光照強(qiáng)度控制在≤300 lux,符合小鼠的生活習(xí)性,。 (二)飼料管理:滿足不同階段需求 常規(guī)飼料:選用輻照滅菌維持料,,其脂肪含量在4-6%,飼料開(kāi)封后需密封保存,,且保質(zhì)期不超過(guò) 1 個(gè)月,,保證飼料的品質(zhì)和安全性,。 特殊需求:繁殖期小鼠需補(bǔ)充維生素E(50IU/kg飼料),,泌乳期則要增加鈣磷比例(Ca:P=1.3:1),針對(duì)性地滿足小鼠不同生理階段的營(yíng)養(yǎng)需求,。 (三)健康監(jiān)測(cè):實(shí)時(shí)掌握鼠群狀態(tài) 日常觀察:每周記錄一次小鼠體重,,同時(shí)留意其毛發(fā)狀態(tài)和活動(dòng)度,,若出現(xiàn)刻板行為,,可能是應(yīng)激反應(yīng)的信號(hào),需及時(shí)關(guān)注,。 哨兵鼠檢測(cè):每季度進(jìn)行一次病原篩查,,重點(diǎn)檢測(cè)支原體,、螺桿菌等病原體,以便盡早發(fā)現(xiàn)潛在的健康問(wèn)題,。 為孕鼠提供滅菌紙棉(5g/籠)作為筑巢材料,注意避免使用易纏繞的纖維條,,防止對(duì)母鼠和幼鼠造成傷害,。 在分娩后的72小時(shí)內(nèi),禁止進(jìn)行稱重,、分籠等操作,,讓母鼠和幼鼠在安靜的環(huán)境中度過(guò)關(guān)鍵期,減少外界干擾對(duì)它們的影響,。 離乳過(guò)渡期(21-28 天): 合理分籠避免沖突 離乳后進(jìn)行分籠,每籠不超過(guò) 5 只,,且按同性別分群,,防止小鼠因打斗受傷,幫助幼鼠順利度過(guò)離乳過(guò)渡期,。
生理因素:初產(chǎn)母鼠(<3 月齡)子宮肌層發(fā)育不全,產(chǎn)力不足,;多胎妊娠(>8 只),、胎兒體重超過(guò)母體 10% 等胎兒異常情況;近親繁殖可能導(dǎo)致骨盆狹窄(發(fā)生率約 3%)的產(chǎn)道結(jié)構(gòu)缺陷,。
營(yíng)養(yǎng)失衡:孕期鈣攝入<800mg/kg 飼料會(huì)引發(fā)鈣磷代謝紊亂,,導(dǎo)致宮縮乏力;孕鼠體脂率>25% 的肥胖問(wèn)題,,可能造成產(chǎn)道脂肪壓迫,。
環(huán)境應(yīng)激:分娩時(shí)溫度低于 25℃ 或濕度大于 60% 的溫濕度異常;持續(xù)>65 分貝的噪音干擾,,會(huì)使產(chǎn)程延長(zhǎng) 40%,。
尸檢與樣本采集:觀察胃內(nèi)容物,,若胃內(nèi)無(wú)乳汁,,可能是泌乳不足或棄養(yǎng),;若出現(xiàn)胃脹氣,可能是細(xì)菌感染,。同時(shí),,取死亡仔鼠肝、腸組織進(jìn)行 PCR 檢測(cè),,排查支原體,、大腸桿菌等病原體。
環(huán)境參數(shù)復(fù)核:檢查過(guò)去 3 天的溫濕度記錄,,確認(rèn)是否在溫度 20-26℃,、濕度 40-60% 的達(dá)標(biāo)范圍內(nèi)。
母鼠健康評(píng)估:測(cè)量哺乳期母鼠體重,,若體重下降>10%,,提示營(yíng)養(yǎng)不足;檢查乳腺,,若出現(xiàn)紅腫,、硬結(jié),可能是乳腺炎,。
飼料與飲水檢測(cè):進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)分析,,確保蛋白質(zhì)、脂肪含量符合繁殖期需求(建議蛋白質(zhì)≥20%,,脂肪≥5%),;進(jìn)行微生物檢測(cè),查看飼料是否霉變,,飲水是否含超標(biāo)細(xì)菌。
低溫休克:立即將小鼠轉(zhuǎn)移至35℃恒溫箱,,同時(shí)進(jìn)行腹腔注射 5% 葡萄糖(0.1ml/10g),,幫助小鼠恢復(fù)體溫和體力。
母鼠食崽:及時(shí)隔離母鼠,,將幼鼠交由代母鼠哺乳,,為混淆氣味,可在幼鼠身上涂抹代母鼠尿液,。
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