• 支原體簡(jiǎn)介

1. 何為支原體：支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡(jiǎn)單的原核生物,，直徑50-300nm,，基因數(shù)量為480，wei一可見(jiàn)的細(xì)胞器只有核糖體,。于1898年Nocard等發(fā)現(xiàn)并命名,，不僅能在無(wú)生命的人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖,，能通過(guò)細(xì)菌濾器。

2. 支原體分布：支原體存在于我們身體很多地方,，如眼睛,，鼻孔，肛門(mén),，口腔,，陰道等都存在支原體。

• 支原體對(duì)細(xì)胞的影響

粘附于宿主細(xì)胞表面的支原體從細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng),，從細(xì)胞膜獲得膽固醇等脂質(zhì),，引起細(xì)胞損傷。在細(xì)胞培養(yǎng)中大多細(xì)胞表現(xiàn)為分泌物增多,、細(xì)胞破碎,、生長(zhǎng)緩慢，嚴(yán)重者導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。
此外,，支原體代謝產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，如溶神經(jīng)支原體能產(chǎn)生神經(jīng)毒素,，引起細(xì)胞膜損傷,；有的支原體含有尿素酶，可以水解尿素產(chǎn)生大量氨,，對(duì)細(xì)胞有毒害作用,。
當(dāng)培養(yǎng)中的細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，漂浮物增多時(shí)就有必要做支原體檢測(cè),。對(duì)于珍貴的細(xì)胞可以做到早發(fā)現(xiàn),，早搶救！

三,、支原體檢測(cè)步驟
1、試劑與耗材：包括引物,、DNA聚合酶,、去離子水、移液器頭,、PCR管等,。
2、模板：細(xì)胞培養(yǎng)48 h后的培養(yǎng)基經(jīng)沸水浴10min,，取上清即可
3,、PCR擴(kuò)增：將反應(yīng)體系配好混勻，選擇合適的程序進(jìn)行擴(kuò)增,。
4,、瓊脂糖糖凝膠電泳（如下圖）
陰性,，無(wú)DNA條帶出現(xiàn)；
陽(yáng)性,，引物1有大小約187 bp的DNA條帶出現(xiàn),；引物2有大小約205bp的DNA條帶出現(xiàn)。

靈賦拓普支原體檢測(cè)優(yōu)勢(shì)：
（1）精準(zhǔn)：采用經(jīng)典的PCR法,，能夠檢測(cè)極微量的樣品,，并且條帶單一，清晰無(wú)雜帶,；
（2）檢測(cè)范圍廣：我們采用2對(duì)引物分別來(lái)檢測(cè),，可檢測(cè)二百多種支原體，涵蓋細(xì)胞培養(yǎng)遇見(jiàn)的所有常見(jiàn)種類,；
（3）高效：收到樣品2天內(nèi)即可出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告,。