慢病毒(Lentivirus) 載體是以HIV-1 (人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體。區(qū)別一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,，它對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,，如原代細(xì)胞,、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞等,，能大大提高目的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,，而且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大大增加，這就為RNAi,、cDNA克隆以及報(bào)告基因的研究提供了一個(gè)有利的途徑,。對(duì)于一些按常規(guī)方法難以轉(zhuǎn)染甚至無法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，通過病毒介導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虼蟠筇岣呋虻霓D(zhuǎn)導(dǎo)效率,，以達(dá)到目的基因的高效瞬時(shí)表達(dá)

慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成,。慢病毒表達(dá)載體，即通常所說的穿梭載體,，包含了包裝,、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 根據(jù)目的基因相關(guān)信息（序列,，序列號(hào)等），構(gòu)建含有外源基因或siRNA的重組載體,；

2. 對(duì)于測(cè)序正確的重組質(zhì)粒,，提取和純化高質(zhì)量的不含內(nèi)毒素的重組質(zhì)粒；

3. 使用高效重組載體和病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T 細(xì)胞,，進(jìn)行病毒包裝和生產(chǎn),，收集病毒液,；

4. 濃縮、純化病毒液,；

5. 用高質(zhì)量的病毒液感染細(xì)胞,；

6. 通過定量PCR精確測(cè)定病毒滴度（高精確滴定方法）和Western 分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

7. 用高質(zhì)量的病毒液感染宿主細(xì)胞,；檢測(cè)基因功能或者siRNA的沉默效率以及使用藥物進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選,，通常狀況下，篩選的細(xì)胞克隆株具有長(zhǎng)期的表達(dá)穩(wěn)定性,。病毒液足夠用于一般的動(dòng)物活體實(shí)驗(yàn),。
  拓普生物提供慢病毒載體構(gòu)建，RNAi(shRNA),、miRNA,、過表達(dá)和干擾慢病毒包裝，以及基于慢病毒技術(shù)的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù),。

拓普生物慢病毒包裝特點(diǎn)：

1.采用第三代4質(zhì)粒慢病毒包裝系統(tǒng),，生物安全性更高； 
2.采用VSV-G包膜,，宿主范圍更廣,； 
3. 產(chǎn)生的慢病毒滴度高，可達(dá)10⁸~10¹⁰TU/mL,； 
4.各種慢病毒穿梭載體可供選擇：過表達(dá),、ShRNA、miRNA,、Tet誘導(dǎo)表達(dá)載體等,； 
5.可帶有熒光報(bào)告基因（GFP、RFP,、mCherry,、Luciferase等）和藥篩標(biāo)記基因（Puro、Neo,、Hygromycin等）,，有多種啟動(dòng)子（CMV、PGK,、CAG、Ubc等）可供選擇,； 
6.4~5周內(nèi)即可完成載體構(gòu)建以及病毒包裝服務(wù),。