腺病毒(adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70~90 nm的顆粒,,由252個(gè)殼粒呈廿面體排列構(gòu)成,。每個(gè)殼粒的直徑為7~9 nm,。衣殼里是線狀雙鏈DNA分子,,約含4.7kb,,兩端各有長約100 bp的反向重復(fù)序列,。由于每條DNA鏈的5'端同相對分子質(zhì)量為55×103Da的蛋白質(zhì)分子共價(jià)結(jié)合,可以出現(xiàn)雙鏈DNA的環(huán)狀結(jié)構(gòu),。
腺病毒(Adenovirus)是目前最高效可靠的重組病毒表達(dá)系統(tǒng)之一,,可用于在哺乳細(xì)胞中瞬時(shí)及高水平地表達(dá)shRNA或目的蛋白。其具備以下優(yōu)點(diǎn):
1. 宿主范圍廣,。腺病毒可感染一系列哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,除可感染幾乎所有人的細(xì)胞類型外,還可感染包括大鼠,、小鼠,、兔、豬,、羊,、猴、雞等物種,。
2. 因腺病毒的感染不依賴細(xì)胞周期,,故其既可以感染增殖細(xì)胞也可以感染非增殖細(xì)胞,。
3. 腺病毒具有嗜上皮細(xì)胞特性,因大多數(shù)腫瘤細(xì)胞均屬于上皮細(xì)胞,,這使得腺病毒非常適合應(yīng)用于基因治療領(lǐng)域,。
4.病毒滴度高,可用于動(dòng)物水平的實(shí)驗(yàn),。
5. 有較好的生物安全性,。腺病毒攜帶的基因不會(huì)整合到宿主細(xì)胞基因組中;實(shí)驗(yàn)中雖然會(huì)有一定機(jī)率出現(xiàn)RCA(即復(fù)制型腺病毒),,但由于大多數(shù)成人體內(nèi)都有針對腺病毒的抗體,所以一般危害不大,。
拓普生物腺病毒包裝技術(shù)特點(diǎn):
(1)采用5型E1/E3缺陷型腺病毒,,生物安全性更高;
(2)最新的AdMAX系統(tǒng),,病毒生產(chǎn)更快捷,;同時(shí)也有AdEasyTM系統(tǒng)可供選擇。
(3)提供溶瘤腺病毒包裝服務(wù),;
(4)有多種過表達(dá)和shRNA腺病毒穿梭載體,;
(5)可帶有熒光標(biāo)記基因(GFP、RFP,、YFP等),,有多種啟動(dòng)子可更換;
(6)包裝空間大,,最高可插入8K目的基因,。
(7)采用柱純化工藝,純度更高,,滴度高達(dá)1010~1011 pfu/mL,。