做過繁育相關(guān)課題的科研寶子們估計(jì)都曾經(jīng)思考過這樣一個(gè)問題:怎樣才能提高小鼠的繁育成功率呢,?有經(jīng)驗(yàn)的師兄師姐會(huì)這樣回答:那當(dāng)然是在小鼠動(dòng)情期合籠成功率是最高的
本期知識(shí)分享將帶您探秘小鼠動(dòng)情周期,,并將靈賦拓普生物多年總結(jié)出的經(jīng)驗(yàn)傾囊相授~
什么是小鼠動(dòng)情周期,? 小鼠動(dòng)情周期是雌性小鼠在生殖系統(tǒng)中的周期性變化,,通常持續(xù)4至5天,。這一周期包括了卵泡發(fā)育,、排卵和子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備等過程,。與人類的月經(jīng)周期類似,,小鼠的動(dòng)情周期也是受到內(nèi)分泌激素的調(diào)控,,如雌激素和孕激素 怎樣區(qū)分動(dòng)情周期,? 1. 生殖器官外觀: 小鼠的生殖器官在不同的動(dòng)情周期階段也會(huì)有所變化,如子宮顏色和大小,、卵巢大小等,;(不過要觀察這些的話,務(wù)必是要傷害到鼠鼠了?。?/p> 2. 行為特征: 小鼠在動(dòng)情周期的不同階段會(huì)表現(xiàn)出不同的行為特征,,如活動(dòng)性增加、尿液標(biāo)記物的變化等(這樣的觀察比較主觀,,得出的結(jié)果也就不那么準(zhǔn)確),。 3. 陰道細(xì)胞涂片: 可以通過取得小鼠陰道內(nèi)的細(xì)胞涂片,觀察陰道上皮細(xì)胞的形態(tài)變化來確定小鼠的動(dòng)情周期階段,。在動(dòng)情周期的不同階段,,陰道細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生變化,如核的形狀和大小,。 陰道細(xì)胞涂片 可以通過取得小鼠陰道內(nèi)的細(xì)胞涂片,,觀察陰道上皮細(xì)胞的形態(tài)變化來確定小鼠的動(dòng)情周期階段。在動(dòng)情周期的不同階段,,陰道細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生變化,,如核的形狀和大小。 以下是靈賦拓普生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)分享的一些做的陰道細(xì)胞涂片的寶貴經(jīng)驗(yàn): 1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 載玻片,,棉球,,棉棒,顯微鑷,,生理鹽水,,福爾馬林,,瑞氏-吉姆薩染液,純水,,中性樹脂,,顯微鏡,蓋玻片 2.涂片制作 a.將顯微鑷卷上棉絮,,卷為米粒大小,,沾濕生理鹽水,插入小鼠陰道口0.5-1cm,,將鑷子貼在陰道壁上從里往外刮10次(保持每只鼠同樣力度與次數(shù),,大鼠則采用棉棒); b.將鑷子棉球放在玻片中央正上空,,滴加生理鹽水直至有液滴掛在棉球上而不掉落,,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)棉棒使細(xì)胞盡可能多的被洗進(jìn)液滴里; c.將液滴從撥片中央往四周平鋪開來(棉棒不要觸碰到玻片,,摩擦?xí)辜?xì)胞破裂),,自然風(fēng)干。 3.涂片固定: 光下轉(zhuǎn)動(dòng)撥片觀察涂片剛好風(fēng)干后(風(fēng)干太久會(huì)使細(xì)胞破裂,,影響后續(xù)效果)放入4%多聚甲醛中固定10min,,用純水洗凈殘留的固定液。 4.涂片染色: 配置染液前與滴加染液前務(wù)必充分搖勻,,將玻片殘留水分盡量甩干,,從旁邊滴加染液,用tip頭鋪平(勿觸碰玻片),,避光常溫孵育10min后(可回收染液,,以備觀察后還需要復(fù)染),清水洗凈,,鏡下觀察,。 5.封片: 鏡下觀察,細(xì)胞均勻,,背景干凈無雜質(zhì),上色程度理想,,即可封片,,撥片中央滴加中性樹脂后蓋蓋玻片,平放靜至過夜后切片盒內(nèi)保存,。 涂片區(qū)分動(dòng)情期,? 首先我們要知道陰道脫落細(xì)胞主要有3 種:白細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞,,角化細(xì)胞,。 1.動(dòng)情前期涂片大部分是有核上皮細(xì)胞,偶有少量角化細(xì)胞; 2.隨著卵泡加速生長(zhǎng),有核上皮細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化成成熟無核角化細(xì)胞進(jìn)入動(dòng)情期,,全部是無核角化細(xì)胞或間有少量上皮細(xì)胞; 3.隨即又開始出現(xiàn)白細(xì)胞,而無核角化細(xì)胞慢慢減少,此時(shí)出現(xiàn) 3 種細(xì)胞(白細(xì)胞角化細(xì)胞有核上皮細(xì)胞)同時(shí)存在的現(xiàn)象,證明已進(jìn)入動(dòng)情后期; 4.隨后,角化細(xì)胞不斷減少白細(xì)胞不斷增多,轉(zhuǎn)化為以白細(xì)胞為主,逐漸進(jìn)入動(dòng)情間期;通常見到以角化細(xì)胞為主則認(rèn)為進(jìn)動(dòng)情期,。 以下是我們靈賦拓普生物技術(shù)員辛勤勞作的結(jié)果,,供大家參考: