1. 模型背景

燙傷模型由高溫固體接觸皮膚造成皮膚損傷。

燙傷等級(jí)分別為

（1）Ⅰ度燒燙傷：表現(xiàn)為受傷處皮 膚輕度紅,、腫,、熱,、痛，感覺過敏,，無水泡,；

（2）Ⅱ度燒燙傷：表現(xiàn)為受傷處皮膚疼痛劇烈、感覺過敏,，有水泡,，水泡撥離后可見創(chuàng)面均勻發(fā)紅、潮濕,、 水腫明顯,；

（3）深Ⅱ度燒燙傷：表現(xiàn)為受傷皮膚痛覺較遲鈍，可有或無水泡,，基底蒼白,，間有紅色斑點(diǎn)， 拔毛時(shí)可感覺疼痛,；

（4）Ⅲ度燒燙傷：皮膚感覺消失,， 無彈性，干燥,，無水泡,，蠟白、焦黃或碳化,，拔毛時(shí)無疼痛,。

目前用于燒傷研究的動(dòng)物模型多種多樣，熱燒傷,、化學(xué)燒傷,、電燒傷以及放射性燒傷的動(dòng)物模型的建立技術(shù)已較為成熟,。

2. 動(dòng)物建模方法—熱燙傷

利用砝碼放入恒溫水浴鍋進(jìn)行加熱，將加熱后的砝碼于動(dòng)物背部固定進(jìn)行致傷,。 溫度 80 ℃,、以砝碼自身重量 (0.5 kg) 作為致傷壓力作用于小鼠致傷區(qū) 5 s、8 s,、12 s,，可獲得不同面積的淺Ⅱ度、深Ⅱ度和Ⅲ度燙傷創(chuàng)面,。

適用動(dòng)物：小鼠/大鼠/新西蘭大白兔

建模過程：以大鼠為例,，造模前24 小時(shí)用脫毛膏將大鼠背部脫毛并麻醉大鼠，將砝碼放入100℃恒溫水浴鍋中加熱10分鐘,，待砝碼加熱后取出置于大鼠背部,，緊貼大鼠背部皮膚 (持續(xù)5秒/8秒/12秒)。燙傷時(shí)砝碼保持平行緊貼于大鼠背部皮膚,，燙傷后燙傷區(qū)域暴露無覆蓋,，之后將實(shí)驗(yàn)組大鼠放回籠中繼續(xù)飼養(yǎng)。

模型驗(yàn)證：

肉眼大體觀察：致傷5s大鼠局部皮膚發(fā)紅,、輕微水腫,。愈合后毛發(fā)生長良好，有少量紅褐色色素沉著,，皮膚輕微攣縮,，表皮光滑。致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白,、水腫,。愈合后毛發(fā)生長良好，皮膚瘢痕形成,，表面粗糙不平,。

光鏡觀察：致傷3s大鼠表皮層次尚清楚，細(xì)胞明顯腫脹,、變性,，層次結(jié)構(gòu)尚清楚，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清,。表皮內(nèi)有水皰形成,，真皮水腫、間質(zhì)疏松,，膠原纖維斷裂,，嗜酸性染色性能減退，呈嗜雙色性,。血管擴(kuò)張,、充血,，皮脂腺、汗腺腺上皮細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞尚清楚,，部分腫脹,、溶解。皮下組織中血管擴(kuò)張,、充血,。致傷10s大鼠表皮細(xì)胞部分脫落，結(jié)構(gòu)不清,，明顯變性,、壞死，部分細(xì)胞已溶解,。表皮內(nèi)有水皰形成,，真皮層間質(zhì)疏松,、充血,，膠原纖維融合成片，嗜酸性染色性能減退,，呈嗜雙色性,，大部分皮脂腺、汗腺,、毛囊被破壞,，結(jié)構(gòu)不清，真皮深部可見殘余毛囊,。皮下組織血管擴(kuò)張,、充血、水腫明顯,，結(jié)構(gòu)未破壞,。上述結(jié)果表明，致傷3s大鼠為淺Ⅱ度燙傷,，致傷10s大鼠為深Ⅱ度燙傷,。

HE染色：對(duì)皮膚進(jìn)行病理檢查和觀察：將燙傷創(chuàng)面連同周邊皮膚約0.5 cm取下，平鋪于濾紙上,，然后固定于10％ 福爾馬林內(nèi),，縱向和橫向切取寬約3-4 mm皮膚，按常規(guī)制備石蠟切片,，切片厚度為5 μm,，蘇木素一伊紅(HE)染色，用顯微鏡觀察并照相,。

IHC染色：進(jìn)行Ki67染色

由皮膚病理切片可知,，造模24h后大鼠皮膚表皮脫落,，真皮層結(jié)締組織壞死，有明顯的水腫現(xiàn)象,，未見皮膚附屬器,。造模10d后模型組大鼠皮膚組織中出現(xiàn)疤痕組織，可見大量的淋巴細(xì)胞,、漿細(xì)胞等炎癥細(xì)胞

doi. org/10.1016/j.carbpol.2024.122603.

H&E染色的傷口組織圖像和用Masson染色的傷口組織圖像

DOI 10.3389/fimmu.2023.1113948

與假手術(shù)相比,，7s燙傷時(shí)皮下結(jié)締組織中凋亡指標(biāo)cC3顯著上調(diào)。結(jié)果以平均±標(biāo)準(zhǔn)差提供,。為了進(jìn)行比較,，我們采用了非配對(duì)t檢驗(yàn)。顯著性水平： ***p < 0.001,。

模型造模要點(diǎn)：

注意事項(xiàng)：注意砝碼的重量,、溫度等因素盡量保持一致。

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：避免不當(dāng)操作致動(dòng)物死亡,，如麻醉過度等,，造模后立即腹腔注射乳酸林格氏液5 mL抗休克。